双吲哚-二肽衍生物,其合成,抗血栓活性和制备抗血栓剂的应用

发明领域

本发明涉及下式的双吲哚衍生物，即2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷，公开了它们的合成，涉及它们的抗血栓活性。因而本发明公开了2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷作为血栓抑制剂的临床应用前景。

背景技术

吲哚乙酸的衍生物吲哚美辛(Indomethacin)除具有抗炎以及解热镇痛作用外，还可以通过抑制血栓素TXA2的合成而抑制血小板的聚集。我们的前期发明披露，通式II的双吲哚衍生物(式中AA为氨基酸残基)在1nml/kg口服剂量下具有抗血栓活性。在急性毒性研究中，发明人发现剂量通式II的双吲哚衍生物的不能溶解。在通式II的双吲哚衍生物的代谢研究中，发明人发现大鼠的粪便中含较高量通式II的双吲哚衍生物。这些发现使发明人认识到，提高双吲哚衍生物的生物利用度至关重要。经过3年摸索，终于发现将通式II的乙基用3-羟基-4-甲氧基苯基代替，并在乙酰-AA中插如Leu残基可以达到改善生物利用度的目标。于是，发明人提出来本发明。

发明内容

本发明的第一个内容是提供通式I的2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基)。

本发明的第二个内容是提供通式I的2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟 基-4-甲氧基苯基)-甲烷的合成方法，该方法包括：

(1)吲哚乙酸在乙醇中经浓硫酸催化，与异香草醛进行Pictet-Spengler缩合，生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(2)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷在NaOH溶液(4N)中皂化反应生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(3)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷与L-Leu-OBzl偶联得到2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(4)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷在甲醇溶液中Pd/C催化生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(5)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷与AA-OBzl偶联得到2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(6)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷在甲醇溶液中Pd/C催化生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷。

本发明的第三个内容是评价2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基)在大鼠模型上的抗栓活性。

附图说明

图1是2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷示意图(式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基)的合成路线.i)异香草醛，浓H₂SO₄，97.7％乙醇；ii)4N>

具体实施方式

为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。

实施例1制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(1)

1g(5.71mmol)吲哚-3-乙酸溶于40ml无水乙醇，滴加1ml浓硫酸，活化20min。加500mg(3.29mmol)3-羟基4-甲氧基苯基醛，室温反应6h，减压浓缩至干。柱层析纯化(石油醚/丙酮＝9/1-5/1)，得到870mg(57％)标题化合物，为淡黄色糖浆。ESI/MS(m/e)：541[M+H]⁺；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝8.40(s，2H)，7.55(m，2H)，7.34(m，2H)，7.13(m，4H)，6.78(m，3H)，6.15(m，1H)，4.18(m，4H)，3.83(s，3H)，3.56(m，4H)，1.30(m，6H)。

实施例2制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(2)

200mg(0.37mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(1)溶于5ml丙酮，4N NaOH调pH＝12。室温反应6h。冰浴下用饱和KHSO₄调pH＝7，减压浓缩除去丙酮后，用饱和KHSO₄调pH＝2，水层用50ml乙酸乙酯萃取3遍，合并乙酸乙酯层，用饱和NaCl洗至中性，无水Na₂SO₄干燥。减压过滤，滤液减压浓缩至干，得到172mg(98％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：483[M-H]^-；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝8.40(s，2H)，7.55(m，2H)，7.34(m，2H)，7.13(m，4H)，6.78(m，3H)，6.15(m，1H)，3.83(s，3H)，3.56(m，4H)。

实施例3制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(3)

冰浴下将968mg(2mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(2)用无水THF溶解，先加入567mg(4.20mmol)HOBt，然后加入906mg(4.40mmol)DCC，搅拌0.5h后加入1729mg(4.40mmol)亮氨酸苄酯，用NMM调节pH到9，反应8h，TLC板监测(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)反应完全。滤除DCU，反应混合液减压浓缩至干，残留物用150mL乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得到的溶液依次用5％NaHCO₃水溶液、饱和NaCl水溶液、5％KHSO₄水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤3次，乙酸乙酯层用无水Na₂SO₄干燥12h，过滤，滤液减压浓缩至干，得到的淡黄色油状物通过硅胶柱柱层析(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)纯化，得到650mg(37％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：891[M+H]⁺；mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝10.90(s，1H)，9.89(s，1H)，7.49(m，2H)，7.38(m，11H)，7.11(m，5H)，6.75(m，2H)，6.61(m，1H)，6.19(m，2H)，5.98(s，1H)，5.62(s，1H)，5.27(q，J＝12.3Hz，2H)，5.15(s，2H)，4.75(m，2H)，3.88(s，3H)，3.58(q，J＝17.7Hz，2H)，3.48(d，J＝16.2Hz，1H)，3.15(d，J＝16.2Hz，1H)，1.60(m，4H)，1.29(m，2H)，0.85(m，12H)。

实施例4制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)

取100mg(0.11mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基 苯基)-甲烷(3)溶于10ml甲醇中，加20mg Pd/C，通入氢气。待TLC检测原料点消失(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)，减压过滤，滤液减压浓缩至干，得到72mg(90％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：709[M-H]^-；mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.61(s，1H)，11.22(s，1H)，10.87(s，1H)，8.99(s，1H)，8.41(m，2H)，7.59(m，2H)，7.24(m，2H)，6.99(m，4H)，6.80(m，1H)，6.61(s，1H)，6.48(m，1H)，6.70(s，1H)，4.50(s，1H)，4.25(m，2H)，3.73(s，3H)，3.41(m，4H)，1.51(m，6H)，0.80(m，12H)。

实施例5制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5a)

冰浴下将800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)用无水THF溶解，先加入319mg(2.37mmol)HOBt，然后加入512mg(2.48mmol)DCC，搅拌0.5h后加入974mg(2.49mmol)Tos·Leu-OBzl，用NMM调节pH到9，反应8h，TLC板监测(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)原料点消失，反应完全。滤除DCU，反应混合液减压浓缩至干，残留物用150mL乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得到的溶液依次用5％NaHCO₃水溶液、饱和NaCl水溶液、5％KHSO₄水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤3次，乙酸乙酯层用无水Na₂SO₄干燥2h，过滤，滤液减压浓缩至干，得到的淡黄色油状物通过硅胶柱柱层析(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)纯化，得到630mg(52.5％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1117[M+H]⁺，1139[M+Na]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.07(s，1H)，10.38(s，1H)，7.51(d，J＝7.5Hz，1H)，7.37(m，13H)，7.09(m，4H)，6.71(m，2H)，6.56(m，1H)，6.41(m，3H)，6.29(m，1H)，5.9(s，1H)，5.75(s，1H)，5.20(m，4H)，4.70(m，1H)，4.52(m，3H)，3.88(s，3H)，3.74(d，J＝17.7Hz，1H)，3.58(d，J＝17.7Hz，1H)，3.39(d，J＝15.9Hz，1H)，3.09(d，J＝15.9Hz，1H)，1.62(m，6H)，1.42(m，6H)，0.90(m，12H)，0.71(m，12H)。

实施例6制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Phe-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5b)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和723mg(2.49mmol)Tos·Phe-OBzl得到620mg(48％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1185[M+H]⁺，1207[M+Na]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.10(s，1H)，10.37(s，1H)，7.48(m，2H)，7.35(m，7H)，7.28(m，3H)，7.12(m，10H)，6.90(m，3H)，6.72(m，4H)，6.56(m，1H)，6.42(m，1H)，6.35(m，2H)，6.25(m，1H)，5.89(s，1H)，5.73(s，1H)，5.32(s，1H)，5.15(m，4H)，4.96(m，1H)，4.84(m，1H)，4.45(m，2H)，3.86(s，3H)，3.76(d，>

实施例7制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Asp-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5c)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和776mg(2.49mmol)Asp(OBzl)-OBzl得到630mg(36％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1323[M+Na]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.01(s，1H)，10.29(s，1H)，7.46(m，2H)，7.29(m，20H)，7.10(m，6H)，6.92(m，2H)，6.71(m，2H)，6.58(m，1H)，6.31(d，J＝8.4Hz，1H)，6.22(d，J＝8.4Hz，1H)，5.95(s，1H)，5.88(s，1H)，5.00(m，10H)，4.50(m，2H)，3.85(s，3H)，3.65(m，3H)，2.90(m，5H)，1.30(m，6H)，0.88(m，6H)，0.74(d，J＝6.0Hz，3H)，0.66(d，J＝6.0Hz，3H)。

实施例8制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ser-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5d)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和232mg(2.49mmol)HCl·Ser-OBzl得到610mg(51％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1087[M+Na]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝9.73(s，1H)，9.44(s，1H)，7.49(m，2H)，7.32(m，11H)，7.27(m，2H)，7.24(m，1H)，7.09(m，4H)，6.61(m，4H)，6.27(s，1H)，5.94(s，1H)，5.21(m，4H)，4.59(m，3H)，4.45(m，1H)，3.78(m，5H)，3.61(m，4H)，3.41(d，J＝16.2Hz，1H)，3.18(d，J＝16.2Hz，1H)，1.39(m，6H)，0.85(d，J＝6.0Hz，6H)，0.71(m，6H)。

实施例9制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Val-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5e)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和939mg(2.49mmol)Tos·Val-OBzl得到310mg(25％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1089[M+H]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝10.99(s，1H)，10.35(s，1H)，7.51(m，1H)，7.35(m，13H)，7.10(m，4H)，6.70(m，2H)，6.55(m，3H)，6.31(s，2H)，5.88(s，1H)，5.72(s，1H)，5.19(m，4H)，4.58(m，4H)，3.86(m，3H)，3.65(m，2H)，3.39(m，1H)，3.09(m，1H)，1.90(m，2H)，1.41(m，6H)，0.83(m，24H)。

实施例10制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Thr-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5f)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和944mg(2.49mmol)Tos·Thr-OBzl得到500mg(42％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1093[M+H]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝10.07(s，1H)，9.64(s，1H)，7.56(m，1H)，7.45(m，1H)，7.33(m，11H)，7.24(m，1H)，7.10(m，6H)，6.69(m，2H)，6.56(m，3H)，6.08(s，1H)，5.96(s，1H)，5.20(m，4H)，4，53(m，4H)，4.25(m，2H)，3.88(m，3H)，3.61(m，2H)，3.42(d，J＝15.9Hz>

实施例11制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Trp-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5g)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和819mg(2.49mmol)HCl·Trp-OBzl得到310mg(22％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1063[M+H]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.18(s，1H)，10.41(s，1H)，7.79(s，1H)，7.59(m，1H)，7.48(m，2H)，7.41(m，1H)，7.31(m，4H)，7.22(m，6H)，7.00(m，9H)，6.74(m，1H)，6.65(m，1H)，6.56(m，2H)，6.37(m，3H)，6.01(m，1H)，5.96(s，1H)，5.87(s，1H)，5.20(m，4H)，5.02(m，5H)，4.78(m，1H)，4.49(m，1H)，4.30(m，1H)，3.81(m，3H)，3.65(m，2H)，3.26(m，5H)，2.42(m，1H)，1.61(m，4H)，1.23(m，2H)，0.82(d，J＝5.7Hz，6H)，0.49(d，J＝6.0Hz，3H)，0.43(d，J＝6.0Hz，3H)。

实施例12制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ile-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5h)

采用实施例5的方法从800mg(1.13mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和974mg(2.49mmol)Tos·Ile-OBzl得到430mg(34％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI/MS(m/e)：1117[M+H]⁺；Mp>1HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.09(s，1H)，10.40(s，1H)，7.52(d，J＝7.2Hz，1H)，7.35(m，13H)，7.09(m，4H)，6.71(m，2H)，6，56(m，3H)，6.31(m，2H)，5.89(s，1H)，5.71(s，1H)，5.16(m，4H)，4.68(m，1H)，4.52(m，3H)，3.87(s，3H)，3.73(d，J＝17.7Hz，1H)，3.58(d，J＝17.7Hz，1H)，3.39(d，J＝15.9Hz，1H)，3.09(d，J＝15.9Hz，1H)，1.92(m，1H)，1.62(m，5H)，1.29(m，6H)，0.89(m，12H)，0.81(m，3H)，0.72(m，3H)，0.60(m，6H)。

实施例13制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6a)

取300mg(0.27mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5a)溶于20mL甲醇中，加60mg Pd/C，通入氢气。待TLC检测原料点消失(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)，减压过滤，滤液减压浓缩至干，得到230mg(92％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：935[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.49(s，1H)，11.62(s，1H)，11.04(s，1H)，8.89(s，1H)，8.40(m，2H)，8.26(m，2H)，7.56(m，2H)，7.31(m，1H)，7.21(m，1H)，6.96(m，4H)，6.79(m，1H)，6.60(s，1H)，6.49(m，1H)，6.19(s，1H)，4.40(m，2H)，4.22(m，2H)，3.72(s，3H)，3.48(m，4H)，1.61(m，6H)，1.49(m，6H)，0.82(m，24H)。

实施例14制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Phe-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6b)

采用实施例13的方法从300mg(0.25mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Phe-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5b)得到250mg(90％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：1003[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.67(s，1H)，11.70(s，1H)，10.99(s，1H)，8.90(s，1H)，8.38(m，4H)，7.57(m，2H)，7.30(m，1H)，7.19(m，11H)，6.98(m，4H)，6.79(m，1H)，6.60(s，1H)，6.41(m，1H)，6.19(s，1H)，4.41(m，4H)，4.09(s，1H)，3.72(s，3H)，3.41(m，3H)，2.99(m，5H)，1.62(m，2H)，1.49(m，4H)，0.79(m，12H)。

实施例15制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Asp-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6c)

采用实施例13的方法从300mg(0.23mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Asp-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5c)得到200mg(93％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：939[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.71(s，3H)，11.64(s，1H)，10.97(s，1H)，8.93(s，1H)，8.45(m，4H)，7.59(m，2H)，7.24(m，2H)，6.99(m，4H)，6.80(m，1H)，6.60(s，1H)，6.41(m，1H)，6.20(s，1H)，4.56(m，2H)，4.42(m，2H)，4.12(s，1H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，2.63(m，4H)，1.56(m，2H)，1.45(m，4H)，0.81(m，12H)。

实施例16制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ser-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6d)

采用实施例13的方法从300mg(0.28mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ser-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5d)得到220mg(88％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：883[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.65(s，1H)，10.98(s，1H)，8.93(s，1H)，8.39(m，4H)，7.58(m，2H)，7.25(m，2H)，6.99(m，4H)，6.80(m，1H)，6.59(s，1H)，6.40(m，1H)，6.20(s，1H)，4.49(m，2H)，4.24(m，2H)，4.12(s，1H)，3.72(s，3H)，3.38(m，8H)，>

实施例17制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Val-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6e)

采用实施例13的方法从300mg(0.28mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Val-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5e)得到230mg(92％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：907[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.58(s，1H)，11.16(s，1H)，8.91(s，1H)，8.43(m，2H)，8.13(m，2H)，7.55(m，2H)，7.33(m，1H)，7.21(m，1H)，6.98(m，4H)，6.78(m，1H)，6.59(s，1H)，6.38(m，1H)，6.19(s，1H)，4.43(m，2H)，4.19(m，2H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，2.01(m，2H)，1.61(m，2H)，1.44(m，4H)，0.81(m，24H)。

实施例18制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Thr-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6f)

采用实施例13的方法从300mg(0.28mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Thr-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5f)得到225mg(90％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：911[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.59(s，1H)，11.06(s，1H)，8.93(s，1H)，8.45(m，2H)，8.03(m，2H)，7.56(m，2H)，7.30(m，1H)，7.21(m，1H)，6.98(m，4H)，6.79(m，1H)，6.59(s，1H)，6.40(m，1H)，6.19(s，1H)，4.50(m，2H)，4.16(m，4H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，1.62(m，2H)，1.48(m，4H)，1.15(m，6H)，0.81(m，12H)。

实施例19制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Trp-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6g)

采用实施例13的方法从300mg(0.24mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Trp-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5g)得到230mg(90％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：1081[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.55(s，1H)，10.99(s，1H)，10.79(s，1H)，8.92(s，1H)，8.35(m，4H)，7.59(m，1H)，7.52(m，3H)，7.30(m，3H)，7.15(m，3H)，6.96(m，8H)，6.77(m，1H)，6.59(s，1H)，6.41(m，1H)，6.19(s，1H)，4.48(m，4H)，3.71(s，3H)，3.42(m，4H)，3.10(m，4H)，1.11(m，3H)，1.41(m，3H)，0.79(m，12H)。

实施例20制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ile-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6h)

采用实施例13的方法从300mg(0.27mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ile-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5h)得到210mg(83％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：935[M-H]^-；Mp>1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.51(s，1H)，11.61(s，1H)，11.03(s，1H)，8.90(s，1H)，8.41(m，2H)，8.17(m，2H)，7.56(m，2H)，7.31(m，1H)，7.21(m，1H)，6.96(m，4H)，>

实施例21评价6a-h的抗血栓活性

1)聚乙烯管的组装：将聚乙烯管拉成一端为斜口的细管，定长为10.0cm，分别为右经静脉(管径较粗)及左颈动脉(管径较细)插管；中段聚乙烯管定长为8.0cm，血栓线压在颈动脉插管方向，插管前需在管中充满肝素。

2)SD大鼠以0.1nmol/kg剂量6a-h灌胃，30分钟后腹腔注射20％的乌拉坦进行麻醉。仰卧位将大鼠固定于鼠板上，剪开颈部皮肤，分离右颈总动脉及左颈静脉，血管下压线，结扎远心端，静脉靠远心端处剪一小口，进行静脉端插管，注射肝素，系线固定，再用动脉夹夹住动脉近心端，靠近远心端方向剪一小口，进行动脉端结扎，系线固定后松开动脉夹，建立体外循环旁路。循环15分钟后先剪断静脉端观察血液循环是否正常，若正常从动脉端取出血栓线，在纸上沾干浮血后称量并记录其湿重，大鼠断颈处死。每组大鼠10只，最后进行数据统计并评价化合物活性。以栓重表示化合物的活性。表1的数据表明，6a-h具有优秀的抗血栓活性，有效剂量低达0.1nmol/kg，比发明人先前公开的双吲哚化合物的有效剂量低10倍，获得了显著的技术效果。在这些化合物中，6a-c，e-g的有效剂量是阿司匹林的1/1670000。

表1 化合物6a-h对SD大鼠栓重的影响

n＝10；a)与生理盐水比p＜0.01；b)与生理盐水及化合物4比p＜0.01，与阿司匹林比p＞0.05；c)与生理盐水比p＜0.01，与化合物4比p＜0.05，与阿司匹林比p＞0.05。