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重组EnbrelFab片段在昆虫细胞表达系统中的制备方法

摘要

本发明涉及重组Enbrel Fab片段在昆虫细胞表达系统中的制备方法,包括:(a)将N端分别带有信号肽的Fab片段的轻链与重链的氨基酸序列的基因克隆于带有双启动子的杆状病毒表达载体内构建重组表达载体;(b)将所得的重组表达载体转座至感受态细胞中,筛选重组菌斑,提取重组质粒,并将其转染至昆虫细胞中,得到重组杆状病毒后进一步扩增病毒,并使用病毒感染放大培养的昆虫细胞以表达Fab蛋白,离心收集含Fab蛋白的上清产物;(c)将所得昆虫细胞表达上清首先使用膜包进行超滤浓缩和置换缓冲溶液,然后色谱柱纯化,即可得到全人源单克隆抗体恩利的Fab片段。

著录项

  • 公开/公告号CN106749664A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2017-05-31

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海美迪西生物医药股份有限公司;

    申请/专利号CN201611045267.8

  • 发明设计人 王涛;汪俊;陈春麟;周南梅;

    申请日2016-11-24

  • 分类号C07K16/28;C07K1/22;C07K1/36;C07K1/34;C12N15/866;

  • 代理机构上海瀚桥专利代理事务所(普通合伙);

  • 代理人郑优丽

  • 地址 201299 上海市浦东新区川大路585号

  • 入库时间 2023-06-19 02:16:22

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2017-06-23

    实质审查的生效 IPC(主分类):C07K16/28 申请日:20161124

    实质审查的生效

  • 2017-05-31

    公开

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