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一种将miRNA转染进猪精子并评估其转染效率的方法

摘要

本发明提供了一种将miRNA转染进猪精子并评估其转染效率的方法,主要步骤为:将稀释后的新鲜猪精液45度立于CO2培养箱中孵育1小时;用巴氏吸管吸出适量上层精子悬浮液;离心浓缩精子后加入等体积稀释液进行稀释;通过X‑tremeGENE siRNA Transfection转染试剂将miRNA转染进精子,将其放置在17℃保温箱上,转染6小时;通过离心沉淀精子,并使用Trizol LS抽提精子中的Total RNA;对抽提出的Total RNA进行miRNA反转以及相关miRNA的定量。该发明有利于日后进行精子转染miRNA的研究实验。

著录项

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2017-11-03

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/68 申请日:20170809

    实质审查的生效

  • 2017-10-10

    公开

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