首页> 中国专利> 一种重组切刻限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法

一种重组切刻限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法

页面导航

摘要
著录项
法律信息
相似文献

摘要

本发明公开了一种重组切刻限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法，通过重组方式将NT.BstNBI切刻酶以及GST标签克隆到含His标签的pACYCDuet‑1表达载体中，其甲基化酶克隆到含阿拉伯糖诱导元件的pBAD‑HisA中利用阿拉伯糖先进行甲基化酶表达保护菌体自身DNA，在低温条件下表达量达到35％。通过组合型标签蛋白表达、Ni柱亲和层析、Superdex 200凝胶过滤层析得到高活力的重组NT.BstNBI切刻酶，用Superdex 200分子筛层析对蛋白进行提纯，经纯化工艺摸索及条件优化，整个纯化过程仅需6h，加上酶切时间也不过20小时,极大简化了纯化过程及时间。

著录项

公开/公告号CN112280763A

专利类型发明专利
公开/公告日2021-01-29

原文格式PDF
申请/专利权人安徽环球基因科技有限公司;
展开▼

申请/专利号CN202011216414.X
发明设计人雍金贵;雍德祥;李森;张伦;
展开▼

申请日2020-11-04
分类号C12N9/16(20060101);C12N15/55(20060101);C12N15/70(20060101);
代理机构34160 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙);
代理人周卫
地址 239000 安徽省滁州市马鞍山路801号
入库时间 2023-06-19 09:43:16

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2022-11-08

发明专利申请公布后的撤回 IPC(主分类):C12N 9/16 专利申请号:202011216414X 申请公布日:20210129

发明专利申请公布后的撤回

相似文献

专利
中文文献
外文文献

1. 一种重组切刻限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法 [P] . 中国专利： CN112280763A . 2021-01-29
2. 一种重组NotI限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法 [P] . 中国专利： CN106967743A . 2017-07-21
3. RECOMBINANT PLASMID DNA ECO 1831RI ENCODING SYNTHESIS OF RESTRICTION ENDONUCLEASE ECO 1831RI, STRAIN OF BACTERIUM ESCHERICHIA COLI - A PRODUCER OF RESTRICTION ENDONUCLEASE ECO 1831RI [P] . 俄罗斯专利： RU2054042C1 . 1996-02-10

机译：重组质粒DNA ECO 1831RI编码限制性内切酶ECO 1831RI，大肠杆菌的菌株-限制性内切酶ECO 1831RI的生产者
4. RECOMBINANT PLASMID DNA PECO 29KI ENCODING SYNTHESIS OF RESTRICTION ENDONUCLEASE ECO 29KI AND STRAIN ESCHERICHIA COLI - A PRODUCER OF RESTRICTION ENDONUCLEASE ECO 29KI [P] . 俄罗斯专利： RU2054037C1 . 1996-02-10

机译：重组质粒DNA PECO 29KI编码限制性内切酶ECO 29KI和应变大肠杆菌的合成-限制性内切酶ECO 29KI的生产商
5. DNA sequence, oligonucleotide primers, the DNA sequence with recognition sites for restriction enzymes NcoI and EcoRI, expression plasmid and a method for its obtaining, recombinant Escherichia coli strain TOP10F 'and its method for obtaining and a method for producing SSB protein-like Psychrobacter arcticus (DSM 17307) [P] . PL397104A1 . 2013-05-27

机译： DNA序列，寡核苷酸引物，具有限制性内切酶NcoI和EcoRI的识别位点的DNA序列，表达质粒及其获得方法，重组大肠杆菌TOP10F菌株及其获得方法和SSB蛋白样北极杆菌的生产方法（DSM 17307）