一种丝裂霉素中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni残留量的检测方法

技术领域

本发明涉及元素杂质检测领域，特别涉及一种丝裂霉素中Cd、Pb、As、 Hg、Co、V、Ni残留量的检测方法。

背景技术

等离子体发射光谱分析法是光谱分析技术中，以等离子体炬作为激发 光源的一种发射光谱分析技术。其中以电感耦合等离子体(ICP)作为激发 光源的发射光谱分析方法，简称为ICP-OES，是光谱分析中研究为深入和 应用为广泛、有效的分析技术之一。电感耦合等离子体焰矩温度可达 6000～8000K，当将试样由进样器引入雾化器，并被氩载气带入焰矩时，则 试样中组分被原子化、电离、激发，以光的形式发射出能量。不同元素的 原子在激发或电离时，发射不同波长的特征光谱，故根据特征光的波长可 进行定性分析；元素的含量不同时，发射特征光的强弱也不同，据此可进 行定量分析。

丝裂霉素为从链霉菌培养液中得到的一种抗生素，为蓝紫色结晶或结 晶性粉末；溶解于丙酮、乙酸乙酯、环己酮，微溶于水。丝裂霉素分子式 为C

丝裂霉素是一种抗肿瘤药物，有关研究表明，丝裂霉素含有烷化作用 的活性基团，可与DNA上的嘌呤形成交叉连接，抑制DNA合成，还可引 起DNA单链断裂和染色体断裂。丝裂霉素具有广谱抗瘤作用，是一种细胞 周期非特异性的药物，丝裂霉素还具有抗菌作用，对革兰阳性菌的作用比 对革兰阴性菌的作用强。

目前，在丝裂霉素的生产过程中使用原辅料、工艺设备、工艺用水会 引入Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素杂质。如果丝裂霉素中Cd、Pb、 As、Hg、Co、V、Ni含量过高，则会导致未知副作用的产生，并严重影响 丝裂霉素的治疗效果。因此，有效维护患者利益，确保药品安全、有效、 质量可控，有必要在现有技术基础之上揭示出一种能检出丝裂霉素中Cd、 Pb、As、Hg、Co、V、Ni含量的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种丝裂霉素中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni 残留量的检测方法，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。

本发明提供的一种丝裂霉素中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni残留量 的检测方法，包括以下步骤：

步骤(1)、取Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素标准溶液适量，加 硝酸溶液稀释，制成线性储备液；取线性储备液适量，加硝酸溶液稀释， 制成线性溶液；

步骤(2)、取丝裂霉素适量于聚四氟乙烯罐中，加硝酸进行消解，再 加入硝酸溶液溶解制成供试品溶液；

步骤(3)、取丝裂霉素适量于聚四氟乙烯罐中，加硝酸进行消解，再 加入线性储备液，最后以硝酸溶液溶解制成加标供试品溶液；

步骤(4)、取线性溶液在电感耦合等离子体发射光谱仪中进行测定， 记录谱图，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，获得 回归方程；

步骤(5)、根据上述步骤(2)、(3)依次对供试品溶液、加标供试品 溶液进行测定。

在某些实施方式中，步骤(1)具体为：

量取各元素标准溶液至容量瓶中，以硝酸溶液进行稀释，得到Cd、Pb、 As、Hg、Co、V、Ni分别为10ug/ml、25ug/ml、75ug/ml、15ug/ml、 25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml的线性储备液①；

分别取线性储备液1.0ml、2.0ml、5.0ml置于容量瓶中，以硝酸溶液进 行稀释，得到Cd分别为0.2ug/ml、0.4ug/ml、1.0ug/ml；Pd分别为0.5ug/ml、 1.0ug/ml、2.5ug/ml；As分别为1.5ug/ml、3.0ug/ml、7.5ug/ml；Hg分别为 0.3ug/ml、0.6ug/ml、1.5ug/ml；Co分别为0.5ug/ml、1.0ug/ml、2.5ug/ml； V分别为1.0ug/ml、2.0ug/ml、5.0ug/ml；Ni分别为2.0ug/ml、4.0ug/ml、 10.0ug/ml的线性溶液②、③、④。

在某些实施方式中，步骤(1)中硝酸溶液的质量分数为2％。

在某些实施方式中，步骤(2)中丝裂霉素的质量为45至50mg，进行 消解的硝酸的加入量为5ml。

在某些实施方式中，步骤(2)中硝酸的质量分数为2％。

在某些实施方式中，步骤(3)具体为：

S1、称取丝裂霉素于聚四氟乙烯罐中，加入硝酸进行消解，转移至容 量瓶中后加入线性储备液，最后加入硝酸溶液溶解并进行稀释，摇匀平行 制备3份，作为加标供试品溶液⑤、⑥、⑦；

S2、称取丝裂霉素于聚四氟乙烯罐中，加入硝酸进行消解，转移至容 量瓶中后加入线性储备液，最后加入硝酸溶液溶解并进行稀释，摇匀平行 制备6份，作为加标供试品溶液⑧、⑨、⑩、

S3、称取丝裂霉素于聚四氟乙烯罐中，加入硝酸进行消解，转移至容 量瓶中后加入线性储备液，最后加入硝酸溶液溶解并进行稀释，摇匀平行 制备3份，作为加标供试品溶液

在某些实施方式中，步骤S1中丝裂霉素的质量为45至50mg，进行消 解的硝酸的加入量为5ml，线性储备液的体积为0.8ml，硝酸溶液的质量分 数为2％。

在某些实施方式中，步骤S2中撕裂霉素的质量为45至50mg，进行消 解的硝酸的加入量为5ml，线性储备液的体积为1.0ml，硝酸溶液的质量分 数为2％。

在某些实施方式中，步骤S3中丝裂霉素的质量为45至50mg，进行消 解的硝酸的加入量为5ml，线性储备液的体积为1.2ml，硝酸溶液的质量分 数为2％。

在某些实施方式中，步骤(4)中电感耦合等离子体发射光谱仪的型号 为PE Avio200，泵流速为1.5ml/min，等离子气流速为12L/min，辅助气流 速为0.4L/min，雾化气流速为0.7L/min，功率为1300W，观测方向为径向。

在某些实施方式中，步骤(5)还包括对加标供试品溶液进行重复性中 间精密度以及回收率测定。

在某些实施方式中，步骤(5)中重复性以及中间精密度测定具体为： 精密称取丝裂霉素6份分别置于聚四氟乙烯罐中，加硝酸5ml进行消解， 转移至25ml容量瓶中，加入线性储备液1.0ml，以2％硝酸溶液溶解并定容 至刻度，作为样品溶液，计算重复性以及精密度。

在某些实施方式中，步骤(5)中回收率的测定具体为：精密称取丝裂 霉素9份，分别置于聚四氟乙烯罐中，加硝酸5ml进行消解，转移至25ml 容量瓶中，加入线性储备液1.0ml，以2％硝酸溶液溶解并定容至刻度，作 为样品溶液，每三份分别加线性储备液0.8ml、1.0ml、1.2ml，加2％硝酸溶 液溶解并定容至刻度，摇匀，作为样品溶液，计算三个浓度下的回收率。

有益效果：本发明实现了对丝裂霉素中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、 Ni残留量的高效测定，操作简单、灵敏度好。

附图说明

图1为Cd线性溶液的谱图；

图2为Pb线性溶液的谱图；

图3为As线性溶液的谱图

图4为Hg线性溶液的谱图；

图5为Co线性溶液的谱图；

图6为V线性溶液的谱图；

图7为Ni线性溶液的谱图；

图8为Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni线性溶液线性图；

图9为供试品溶液中Cd的谱图；

图10为供试品溶液中Pb的谱图；

图11为供试品溶液中As的谱图；

图12为供试品溶液中Hg的谱图；

图13为供试品溶液中Co的谱图；

图14为供试品溶液中V的谱图；

图15为供试品溶液中Ni的谱图。

具体实施方式

下面结合附图所示的各实施方式对本发明进行详细说明，但应当说明 的是，这些实施方式并非对本发明的限制，本领域普通技术人员根据这些 实施方式所作的功能、方法、或者结构上的等效变换或替代，均属于本发 明的保护范围之内。

除非说明书中有特殊说明，本发明中的各个实施例中的组分、原料均 采用分析纯级别。另外，各实施例中的“g”、“mg”分别为重量单位“克”、 “毫克”；“ml”为体积单位“毫升”。

实验仪器与试剂

实验仪器：采用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP)的型号为PE Avio 200；

实验试剂：Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素标准溶液、丝裂霉素、 硝酸；

检测条件：泵流速为1.5ml/min，等离子气流速为12L/min，辅助气流 速为0.4L/min，雾化气流速为0.7L/min，功率为1300W，观测方向为径向。

检测步骤：

步骤(1)、量取市售各元素标准液Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni分 别为0.5ml、1.25ml、3.75ml、0.75ml、1.25ml、2.5ml、5.0ml至50ml容量 瓶中，以2％硝酸溶液稀释至刻度，得到Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni 分别为10ug/ml、25ug/ml、75ug/ml、15ug/ml、25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml的线性储备液①；分别取线性储备液1.0ml、2.0ml、5.0ml置于50ml 容量瓶中，以2％硝酸溶液稀释至刻度，得到Cd分别为0.2ug/ml、0.4ug/ml、 1.0ug/ml；Pd分别为0.5ug/ml、1.0ug/ml、2.5ug/ml；As分别为1.5ug/ml、 3.0ug/ml、7.5ug/ml；Hg分别为0.3ug/ml、0.6ug/ml、1.5ug/ml；Co分别为 0.5ug/ml、1.0ug/ml、2.5ug/ml；V分别为1.0ug/ml、2.0ug/ml、5.0ug/ml； Ni分别为2.0ug/ml、4.0ug/ml、10.0ug/ml的线性溶液②、③、④；

步骤(2)、称取丝裂霉素50mg(45～50mg)于聚四氟乙烯罐中，加硝 酸5ml进行消解，转移至25ml容量瓶中，加2％硝酸溶液溶解并定容至刻 度，制成供试品溶液；

步骤(3)、称取丝裂霉素50mg(45～50mg)于聚四氟乙烯罐中，加硝 酸5ml进行消解，转移至25ml容量瓶中，加入线性储备液0.8ml，加2％ 硝酸溶液溶解并定容至刻度，摇匀平行制备三份，作为加标供试品溶液⑤、 ⑥、⑦；称取丝裂霉素50mg(45～50mg)于聚四氟乙烯罐中，加硝酸5ml 进行消解，转移至25ml容量瓶中，加入线性储备液1.0ml，加2％硝酸溶液 溶解并定容至刻度，摇匀平行制备六份，作为加标供试品溶液⑧、⑨、⑩、

步骤(4)、线性测定：取2％硝酸溶液以及线性溶液②、③、④分别测 定，以进样浓度(ug/ml)为横坐标，响应值为纵坐标，进行线性回归，获 得线性方程为Cd：y＝1000000x-1069.2，相关系数为1.000；Pd： y＝5613x-106.6，相关系数为1.000；As：y＝1050x-163.8，相关系数为0.999；Hg：y＝4356x+54.3；Co：y＝38670x+54.3，相关系数为1.000；V： y＝73000x-2835.3，相关系数为1.000；Ni：y＝42860x-3001.8，相关系数为 1.000；

步骤(5)、供试品溶液测定：取供试品溶液进样，将获得响应值代入 线性方程中，计算出供试品溶液中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素的 浓度。图1-7中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素分别在波长为228.802nm、 220.353nm、188.979nm、194.168nm、228.616nm、292.464nm、231.604nm 响应，图8-9为对应的线性曲线，图10-15为对应波长处供试品溶液中Cd、 Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素的响应。通过将供试品溶液中Cd、Pb、As、 Hg、Co、V、Ni元素的响应值代入线性曲线中，即可得到供试品溶液中各 元素的含量。由此可见，通过本检测方法可以对丝裂霉素中所含的Cd、Pb、 As、Hg、Co、V、Ni元素实现高效可靠的定量分析，且灵敏度较高。

重复性测定：取加标供试品溶液⑧、⑨、⑩、

表1

中间精密度测定：另一名化验员，重新配制六份平行加标供试品溶液， 分别进样，记录响应值，计算RSD，结果见表2(中间精密度测定结果)。

表2

准确度测定：取加标供试品溶液三种浓度，各浓度三份，低浓度溶液⑤、 ⑥、⑦，中浓度溶液⑨、⑩，高浓度溶液

准确度通过加样回收率体现，加样回收率(％)＝(测得量-样品引入量) /加入量*100％。Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni元素的加样回收率测定结果 分别见表3-9。

表3

表4

表5

表6

表7

表8

表9

综上所述：本发明实现了对丝裂霉素中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、 Ni残留量的高效测定，操作简单、灵敏度好。

以上表述仅为本发明的优选方式，应当指出，对本领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进， 这些也应视为发明的保护范围之内。