一种尿白蛋白/尿肌酐复合质控品及其制备方法

技术领域

本发明涉及分析检测领域，具体涉及一种尿白蛋白/尿肌酐复合质控品及其制备方法。

背景技术

糖尿病肾病是我国最常见的慢性病之一，其诊断的金标准是测定24小时尿微量白蛋白的排泄率。但此法标本留取麻烦费时、患者依从性差、检测结果重复性和准确性较差，致使其在临床上的应用受到了一定的限制。尿肌酐与尿浓度有极好的相关性，且不受肾脏基底膜病变的影响，因此，用尿肌酐做校正可消除取样方式和尿液浓度对尿白蛋白排泌量的影响，所以，KDOQI糖尿病肾病指南及美国糖尿病协会(ADA)均推荐尿白蛋白/尿肌酐比(urinary albumin-to-creatinine ratio，ACR)作为筛查微量白蛋白尿的首选方法。

即时检验(point-of-care testing，POCT)是一项新兴的技术领域，主要特点是快速得出结果，操作简便，容易使用和小型化。随着诊断和辅助技术的进步，以及人们对疾病的认识及治疗水平提高的要求，POCT逐渐受到关注。事实上POCT在欧美市场已逐渐成为体外诊断试剂与仪器领域的重要研究项目，已有不少产品投入市场，但这类POCT仪器目前有一个重要缺陷，就是分析仪及试剂耗材特别昂贵，对于中国这样具有庞大基层医疗系统，且试剂使用量极大的国家来说，目前欧美开发的仪器及配套试剂耗材显然都面临挑战。

微流控芯片技术是21世纪世界最为重要的前沿技术之一，它把生物和化学等领域中所涉及的样品制备、反应、分离、检测及细胞培养、分选、裂解等基本操作单元集成到一块几十平方厘米(甚至更小)的芯片上，由微通道形成网络，以可控流体贯穿整个系统，是用以取代常规生物或化学实验室的各种功能的一种技术。将微流控芯片技术引入到POCT设备，开创了POCT发展的新局面，可使以往实验室繁复之全血定量、血球血清分离、血清稀释及同步测定等步骤，在芯片在线自动化作业完成，达到多种标记同步检测目的。结合了微流控芯片技术的POCT分析仪兼具高准确度、低需血量、操作简单、检测试剂用量少、成本低等优点，非常适用于中国这样具有庞大基层医疗系统且试剂使用量极大的国家。因此，提供一种可用于离心式微流控芯片的尿白蛋白/尿肌酐复合质控品对保证基于微流控技术的尿白蛋白/尿肌酐检测试剂的实验室检测结果质量，减少误差，使不同实验室之间的结果具有较好可比性有重要作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种可用于离心式微流控芯片的尿白蛋白/尿肌酐复合质控品,以保证基于微流控技术的尿白蛋白/尿肌酐检测试剂的实验室检测结果质量，减少误差。

本发明提供了如下的技术方案：

一种尿白蛋白/尿肌酐复合质控品，由以下组份组成：

缓冲液：50～100mmol/L；

盐类：5～15g/L；

氟芬那酸：5～15g/L；

二甲基亚砜：5～15g/L；

还原剂：5～15g/L；

右旋糖酐：5～15g/L；

去泡剂：5～15g/L；

增粘剂：0.5-1g/L；

人血清白蛋白：100～200mg/L；

肌酐：10～20mmol/L；

防腐剂：1g/L；

所述质控品的PH为7.2～7.4；

优选的，所述的缓冲液为羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪丙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液、3-三羟甲基甲胺-2-羟基丙磺酸缓冲液、巴比妥钠-盐酸缓冲液中的一种。

优选的，所述盐类为氯化钠、氯化钾、氯化镁中的一种或多种。

优选的，所述还原剂为三羧基乙基膦、谷胱甘肽、二硫苏糖醇中的一种。

优选的，所述去泡剂为肌醇、曲拉通X-100中的一种。

优选的，所述增粘剂为Emulgen B66、吐温-20、吐温-80、司盘60中的一种或多种。

优选的，所述的防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、叠氮钠、Proclin 300中的一种或多种。

优选的，本尿白蛋白/尿肌酐复合质控品应用于评价基于微流控技术的尿白蛋白/尿肌酐检测试剂的准确度。

一种用于离心式微流控芯片的尿白蛋白/尿肌酐复合质控品的制备方法，包括以下步骤：

S1、向容器中加入纯化水，然后向纯化水中依次加入缓冲液、盐类、氟芬那酸、二甲基亚砜，搅拌至完全溶解，

S2、加入肌酐，用0.22mm滤膜过滤一次；

S3、在温度为25±0.5℃下，用稀盐酸溶液或0.1％的氢氧化钠溶液调节PH值至7.2～7.4；

S4、向所得溶液中加入还原剂，右旋糖酐，去泡剂，增粘剂，防腐剂，搅拌至完全溶解；

S5、加入人血清白蛋白，用0.22mm滤膜过滤一次；得到尿白蛋白/尿肌酐复合质控品。

本发明的有益效果：

1、本发明选用了适宜的缓冲液及盐浓度，添加了氟芬那酸及二甲基亚砜，减少了肌酐在溶液中长期保存过程中的降解；

2、还原剂和右旋糖酐的配合使用，可以防止人血清白蛋白被氧化沉淀；

3、去泡剂可以防止离心及混匀过程中产生气泡，影响检测结果的准确性；

4、适宜浓度的增粘剂可使质控品能顺利通过微流控通道，并能促进质控品的稳定。

具体实施方式

实施例1：

一种尿白蛋白/尿肌酐复合质控品，由以下组份组成：

羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液：50mmol/L；氯化钠：5g/L；氟芬那酸：5g/L；二甲基亚砜：5g/L；三羧基乙基膦：5g/L；右旋糖酐：5g/L；肌醇：5g/L；Emulgen B66：0.5g/L；人血清白蛋白：120mg/L；肌酐：18mmol/L；Proclin 300：1g/L；质控品的PH为7.2。

制备方法包括以下步骤：S1、向容器中加入纯化水，然后向纯化水中依次加入羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液、氯化钠、氟芬那酸、二甲基亚砜，搅拌至完全溶解；S2、加入肌酐，用0.22mm滤膜过滤一次；S3、在温度为25℃下，用稀盐酸溶液或0.1％的氢氧化钠溶液调节PH值至7.2；S4、向所得溶液中加入三羧基乙基膦，右旋糖酐，肌醇，Emulgen B66和Proclin300，搅拌至完全溶解；S5、加入人血清白蛋白，用0.22mm滤膜过滤一次；得到尿白蛋白/尿肌酐复合质控品。

实施例2

一种尿白蛋白/尿肌酐复合质控品，由以下组份组成：

羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液：50mmol/L；氯化钠：5g/L；氟芬那酸：5g/L；二甲基亚砜：5g/L；三羧基乙基膦：5g/L；右旋糖酐：5g/L；肌醇：5g/L；Emulgen B66：0.5g/L；人血清白蛋白：180mg/L；肌酐：10mmol/L；Proclin 300：1g/L；质控品的PH为7.2。

制备方法包括以下步骤：S1、向容器中加入纯化水，然后向纯化水中依次加入羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液、氯化钠、氟芬那酸、二甲基亚砜，搅拌至完全溶解；S2、加入肌酐，用0.22mm滤膜过滤一次；S3、在温度为25℃下，用稀盐酸溶液或0.1％的氢氧化钠溶液调节PH值至7.2；S4、向所得溶液中加入三羧基乙基膦，右旋糖酐，肌醇，Emulgen B66和Proclin300，搅拌至完全溶解；S5、加入人血清白蛋白，用0.22mm滤膜过滤一次；得到尿白蛋白/尿肌酐复合质控品。

下面结合表格对本发明实施例制备的质控品的性能进行说明。

1、2-8℃储存稳定性

本发明上述实施例制备的质控品，在2-8℃环境中保存的检测结果如下表所示：

从上表的检测数据可知，本发明的质控品可存放至少12个月时间。

2、微通道通过率

将微流控试剂盘平放在检测平台上，用移液枪吸取2μL本发明上述实施例制备的质控品，缓慢加入到芯片样本孔流道的顶端，观察其是否能顺畅铺满流道；合格标准为被测样品能铺满整个流道。分别于第0、3、6、9、12月检测质控品的微通道通过率。

从上表的检测数据可知，第0、3、6、9、12月质控品的微通道通过率的合格率均为100％，说明本发明质控品可以顺利通过微通道。

实施例所用的原料，除另有说明外，均为市售工业品

以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。