公开/公告号CN112957364A
专利类型发明专利
公开/公告日2021-06-15
原文格式PDF
申请/专利权人 杭州立效生物医药科技有限公司;
申请/专利号CN202110329860.X
发明设计人 吴晓凤;
申请日2021-03-29
分类号A61K31/706(20060101);A61P13/12(20060101);
代理机构33310 杭州知杭知识产权代理事务所(普通合伙);
代理人孙稚源
地址 310056 浙江省杭州市滨江区长河街道滨安路688号5幢
入库时间 2023-06-19 11:27:38
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗肾小管损伤的药物及其应用。
背景技术
肾结石，又称肾结石病，是澳洲茄边碱在肾小管损伤中的应用非常常见的泌尿系统疾病，影响着世界范围内大量的患者。肾结石是由尿路和肾脏中盐的溶解和沉淀不平衡引起的。肾结石由70％至80％草酸钙组成，高血尿是肾结石的关键危险因素。据估计，其患病率高达14.8％并呈上升趋势，在首发后5-10年内复发率高达50％。肥胖、糖尿病、高血压、代谢综合征等危险因素是导致KS形成的重要因素。如果不能有效治疗，可导致显著的发病率，严重影响肾结石患者的生活质量。草酸钙结石质地坚硬，手术碎石效果相对较差，成为肾结石临床治疗过程中的一个挑战。
80％的肾结石含有草酸钙的成分，草酸是机体代谢的澳洲茄边碱在肾小管损伤中的应用最终产物，是具有毒性的二元有机酸。当人体内草酸浓度超出肾脏的排泄能力时，草酸会在尿路结晶形成草酸晶体。草酸晶体可与来自食物的钙离子结合形成不溶性的草酸钙晶体并沉积在肾小管中。草酸钙晶体粘附于肾小管上皮细胞是形成肾结石的先决条件。
有报道称草酸盐可通过触发细胞内氧化应激引起肾小管上皮细胞氧化损伤(RTECOI)。RTECOI可能最终导致草酸盐钙结石的形成。虽然治疗肾结石的策略已经越来越发达，但据我们所知，目前还没有有效的方法来预防RTECOI，因此，发现预防RTECOI的候选药物是非常必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗肾小管损伤的药物及其应用，解决背景技术中提及预防RTECOI的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：所述药物以澳洲茄边碱为活性成分，所述澳洲茄边碱浓度范围为0～10μM。
优选的，所述药物由所述澳洲茄边碱和一种或多种可药用的载体辅料制备而成。
优选的，所述肾小管损伤为肾小管上皮细胞氧化损伤。
优选的，所述肾小管损伤为肾结石对肾小管上皮细胞造成的氧化损伤。
优选的，所述澳洲茄边碱用于保护肾小管上皮细胞免受肾结石造成的氧化损伤。
优选的，如上任一所述的药物在制备治疗治疗肾小管损伤的药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)通过应用澳洲茄边碱可以保护肾小管上皮细胞的氧化损伤，最终抑制草酸盐钙结石的形成；
(2)为预防肾小管上皮细胞氧化损伤的提供了候选药物。
附图说明
图1表示澳洲茄边碱(SM)抑制NRK-52E细胞中草酸盐导致的草酸钙晶体沉积；
图2表示澳洲茄边碱(SM)可降低NRK-52E细胞中草酸盐导致的凋亡。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
细胞培养
肾小管上皮细胞NRK-52E细胞系是褐家鼠肾脏细胞系。
将细胞培养在含10％得胎牛血清和1％青霉素链霉素的DMEM中。
实施例2：
在SM-L,SM-M和SM-H组，使用4μM,6μM和8μM澳洲茄边碱处理NRK-52E细胞16小时后，再用0.75mM草酸盐处理model,SM-L,SM-M和SM-H组3小时；然后立即用福尔马林固定15分钟；之后对样品进行临界点干燥，再涂铂；使用冷场扫描电子显微镜对涂层样品进行扫描，扫描电子显微镜显示草酸钙晶体形成。
附图1中箭头指示物表示草酸钙晶体。
结果见附图1，澳洲茄边碱抑制NRK-52E细胞中草酸盐导致的草酸钙晶体沉积。
实施例3：
流式细胞术分析
使用4μM,6μM和8μM澳洲茄边碱处理NRK-52E细胞后，再用0.75mM草酸盐处理；
细胞凋亡检测方法为:在4℃,1000g条件下离心细胞5分钟，然后将得到的细胞沉淀与Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)以及碘化丙啶(PI)在室温下孵育25分钟；最后使用流式细胞仪测定细胞凋亡率。
结果见附图2，0.75mM的草酸盐显著升高细胞内活性氧(ROS)水平和诱导凋亡；澳洲茄边碱浓度依赖性地缓解草酸盐的作用。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
机译： 用于治疗药物的组合药物治疗肾小管功能损伤引起的疾病
机译： 选择性催产素受体拮抗剂在药物制备中的应用，该药物用于治疗早泄，是鉴定一种或多种上述拮抗剂和一种或多种上述拮抗剂的药物和药物组合物的测定方法。
机译： 选择性催产素受体拮抗剂在药物制备中的应用，该药物用于治疗早泄，是鉴定一种或多种上述拮抗剂和一种或多种上述拮抗剂的药物和药物组合物的测定方法。
