大麻素在治疗与癫痫相关的共病中的用途

发明领域

本发明涉及大麻二酚(CBD)的特定组合物在治疗与癫痫相关的共病中的用途。在一种实施方案中，令人惊讶地发现其中癫痫发作没有减少的患者的共病被改善。

所使用的CBD呈大麻属(cannabis)的高度纯化的提取物的形式，使得CBD以大于总提取物的98％(w/w)存在并且该提取物的其他组分被表征。特别地，大麻素四氢大麻酚(THC)以从0.02％(w/w)至0.1％(w/w)的量存在。

发明背景

癫痫发生在全世界约1％的人口中(Thurman等人,2011)，其中70％能够用现有可得的抗癫痫药物(AED)充分控制其症状。然而，该患者组的30％(Eadie等人,2012)不能从可得的AED获得无癫痫发作(seizure freedom)，并且因此被称为患有顽固性或“治疗耐受性癫痫”(TRE)。

顽固性或治疗耐受性癫痫在2009年被国际抗癫痫联盟(the InternationalLeague Against Epilepsy)(ILAE)定义为“无法胜利通过两项被耐受的并且被适当选择和使用的AED方案(无论是作为单一疗法或组合地)的试验来达到持续的无癫痫发作”(Kwan等人,2009)。

在生命的最初几年间发展癫痫的个体通常难以治疗，并且因此通常被称为治疗耐受性的。儿童期经历频繁癫痫发作的儿童通常留下可以引起认知、行为和运动延迟的神经损伤。

儿童期癫痫是儿童和年轻成人中相对常见的神经紊乱，患病率约为700/100,000。按照人口，这是患癫痫的成人的数目的两倍。

当儿童或年轻成人出现癫痫发作时，通常进行调查以调查原因。儿童期癫痫可能由许多不同的综合征和遗传突变引起，并且因此对这些儿童的诊断可能需要一些时间。

癫痫的主要症状是反复的癫痫发作。为了确定患者患有的癫痫或癫痫综合征的类型，对患者正在经历的癫痫发作的类型进行调查。进行临床观察和脑电图(EEG)测试，并且根据下文描述的ILAE分类对癫痫发作的类型进行分类。

由ILAE提出的癫痫发作类型的国际分类于1981年被采用，并且ILAE于2010年公布了一份修订提案，而该提案尚未取代1981年的分类。图1改编自2010年对修订术语的提案并且包括所提出的将部分性(partial)的术语替换为局灶性(focal)的改变。此外，术语“单纯部分性癫痫发作”已经被术语“其中知觉/应答性未受损的局灶性癫痫发作”替换，并且术语“复杂部分性癫痫发作”已经被术语“其中知觉/意识受损的局灶性癫痫发作”替换。

其中癫痫发作发生于双侧分布的网络内并且快速占据(engage)该双侧分布的网络的全身性癫痫发作可以被分为以下六种亚型：强直性-阵挛性(癫痫大发作(grand mal))癫痫发作；失神性(癫痫小发作(petit mal))癫痫发作；阵挛性癫痫发作；强直性癫痫发作；失张力性癫痫发作(Atonic Seizure)和肌阵挛性癫痫发作。

其中癫痫发作起源于局限于仅一个半球的网络内的局灶性(部分性)癫痫发作也被分成更多个亚类。此处癫痫发作根据癫痫发作的一个或更多个特征来表征，该特征包括先兆、运动、自主应答性和知觉/应答性。当癫痫发作以局部性癫痫发作开始并快速演变为分布于双侧网络内时，这种癫痫发作被称为双侧惊厥性癫痫发作，双侧惊厥性癫痫发作是被提议的替换继发的全身性癫痫发作(已经从局灶性癫痫发作演变并且不再保持为局部性的全身性癫痫发作)的术语。

癫痫综合征通常表现出许多不同类型的癫痫发作，并且识别患者患有的癫痫发作的类型是重要的，因为许多标准AED的目标是治疗给定癫痫发作类型/亚型或仅对给定癫痫发作类型/亚型有效。

一种这样的儿童期癫痫是Dravet综合征。Dravet综合征的发作几乎总是发生在生命的第一年，在先前健康和发育正常的婴儿中伴有阵挛性和强直性-阵挛性癫痫发作(Dravet，2011年)。症状在约五个月大时达到顶峰。其他癫痫发作发生在1岁和4岁之间，诸如长时间的局灶性认知障碍癫痫发作和短暂的失神性发作。

在诊断Dravet综合征时，局灶性癫痫发作和全身性癫痫发作两者均被认为是强制性的，Dravet患者还可能经历非典型失神性癫痫发作、肌阵挛失神性癫痫发作、失张力性癫痫发作和非惊厥性癫痫持续状态。

癫痫发作发展得越来越频繁并且是治疗耐受性的，意味着癫痫发作不对治疗响应良好。它们也倾向于延长，持续超过5分钟。长时间的癫痫发作可能导致癫痫持续状态，这是一种持续超过30分钟的癫痫发作，或一个接一个地成簇发生的癫痫发作。

预后不良并且约14％的儿童在癫痫发作期间死亡，这是因为感染，或由于不确定原因的突然死亡，通常是因为不间断的神经衰退。患者发展成智力残疾和终身持续的癫痫发作。智力损害从50％的严重患者到各自占病例的25％的中度和轻度智力残疾变化。

目前没有FDA批准的专门针对Dravet综合征的治疗。护理标准通常涉及以下抗惊厥药的组合：氯巴占、氯硝西泮、左乙拉西坦、托吡酯和丙戊酸。

司替戊醇在欧洲被批准与氯巴占和丙戊酸联合治疗Dravet综合征。在美国，司替戊醇在2008年被授权为用于治疗Dravet综合征的孤儿药(Orphan Designation)；然而，该药物未被FDA批准。

用于治疗癫痫的强效钠通道阻断剂实际上增加患有Dravet综合征的患者的癫痫发作频率。最常见的是苯妥英、卡马西平、拉莫三嗪和卢非酰胺。

管理还可以包括生酮饮食、以及物理和迷走神经刺激。除了抗惊厥药物，许多患有Dravet综合征的患者还用抗精神病药物、刺激剂和治疗失眠的药物进行治疗。

另一种这样的儿童期癫痫综合征是Lennox-Gastaut综合征(LGS)。LGS是一种严重的癫痫形式，其中癫痫发作通常在4岁前开始。癫痫发作类型因患者而异，包括强直性(身体僵硬、目睛上视(upward deviation of the eyes)、瞳孔扩张和呼吸模式改变)、失张力性(肌张力和意识的短暂丧失，导致突然跌倒)、非典型失神性(神志恍惚(staring spell))和肌阵挛性(突然肌肉猝动)。可能存在与短暂的相对无癫痫发作时间段混合的频繁癫痫发作的时间段。

LGS中的癫痫发作通常被描述为“跌倒型癫痫发作(drop seizure)”。这样的跌倒型癫痫发作被定义为导致或可能导致倒下、受伤、瘫坐在椅子上或在表面上撞击患者头部的涉及全身、躯干或头部的疾病发作(attack)或恍惚(spell)(失张力性、强直性或强直性-阵挛性)。

大多数患有LGS的患者经历一定程度的受损的智力功能或信息加工，伴随发育迟缓和行为障碍。

LGS可以由脑畸形、围产期窒息、严重头部损伤、中枢神经系统感染和遗传性退行性状况或代谢性状况引起。在30％-35％的病例中未能找到病因。

用于跌倒型癫痫发作的一线治疗，包括对患有LGS的患者的跌倒型癫痫发作的治疗，通常包括广谱AED，诸如通常与卢非酰胺或拉莫三嗪组合的丙戊酸钠。其他可以被考虑的AED包括非尔氨酯、氯巴占和托吡酯。

共病发生在许多被诊断为患有癫痫或癫痫综合征的患者中。

共病被定义为存在一种或更多种与原发状况同时发生的其他紊乱。存在多种与癫痫相关的共病状况。2007NINDS Epilepsy Research Benchmarks将共病包括作为衡量基准中的一种(衡量基准领域III：预防、限制和逆转与癫痫相关的共病及其治疗)，并且医学研究所(the Institute of Medicine)也在关于癫痫的IOM报告中确定了癫痫共病。

许多状况可能与癫痫共病，然而，癫痫的最常发生的共病包括精神紊乱、认知紊乱、偏头痛、睡眠紊乱；心血管紊乱、呼吸系统紊乱、炎症紊乱和癫痫猝死症(suddenunexpected death in epilepsy，SUDEP)。

一些抗癫痫药物可能对认知功能障碍、情绪或行为具有负面作用，并且在这些领域存在共病的患者中应谨慎使用。AED还可能引起行为副作用，并且这些作用可能在患有共存的行为共病的人中更常见。

在2009年公布的一篇论文描述了以下共病状况，其在患有癫痫的人群中具有的比率显著高于一般人群的比率(Seidenberg等人.2009)。

医学共病状况：肌肉骨骼系统紊乱；胃肠和消化紊乱；呼吸系统紊乱；慢性疼痛紊乱；脑血管意外；偏头痛；瘤形成；关节炎；风湿病；肥胖；糖尿病；感染；骨折和过敏。

精神共病状况：抑郁症；焦虑；孤独症谱系紊乱；发作间期焦虑紊乱；癫痫的发作间期行为综合征和精神病。

认知共病状况：注意缺陷多动障碍；学习障碍；智力迟钝；阿尔茨海默病和痴呆症。

Rosenberg等人.2017描述了一项研究，其中生活品质(QOL)在护理人员报告的儿童期癫痫的生活品质(QOLCE)问卷中被测量。儿童癫痫患者被纳入一项为期12周的CBD的前瞻性开放标签研究。在精力/疲劳；记忆力；其他认知功能；控制/无助；社交互动；行为和整体生活品质领域中看到改善。该组报告，QOL的变化与癫痫发作频率的变化或副作用无关。该组还认识到除了与此类问卷相关的固有偏倚之外，与缺乏比较组的非盲研究相关的局限性。

申请人已经示出，在患有癫痫的患者中施用特定的CBD组合物对治疗与癫痫相关的某些共病具有显著影响。令人惊讶的是，发现患者中的某些共病被改善，而与癫痫发作负担(seizure burden)的改善无关。

发现待改善的领域是注意力和集中；羞耻感(stigma item)；一般健康；语言和社交活动。这些改善在开放标签研究和随机对照试验两者中均看到，并且因此提供生活品质的这样的改善的有力证据。

所使用的CBD呈大麻属的高度纯化的提取物的形式，使得CBD以大于总提取物的98％(w/w)存在并且该提取物的其他组分被表征。特别地，大麻素四氢大麻酚(THC)以从0.02％(w/w)至0.1％(w/w)的量存在。

共同未决的申请WO2019/207319描述了令人惊讶的发现，包含少量大麻素CBD-C1、CBDV、CBD-C4和THC的植物来源的纯化的CBD制品相比于不包含少量大麻素的合成CBD具有增加的效力。

这些数据特别令人惊讶，特别是考虑到植物来源的纯化的CBD制品和合成制品中的CBD的浓度是相同的这一事实。

本发明证明相同植物来源的纯化的CBD改善与癫痫相关的某些共病的能力。

本公开内容的简述

根据本发明的第一方面，提供了一种大麻二酚(CBD)制品，用于在治疗与癫痫相关的共病中使用，其中CBD制品包含大于或等于98％(w/w)的CBD和小于或等于2％(w/w)的其他大麻素，其中小于或等于2％(w/w)的其他大麻素包括大麻素四氢大麻酚(THC)；大麻二酚-C1(CBD-C1)；次大麻二酚(CBDV)；以及大麻二酚-C4(CBD-C4)，并且其中THC作为反式-THC和顺式-THC的混合物存在。

优选地，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的不超过1.5％(w/w)的THC。

更优选地，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.01％(w/w)至约0.1％(w/w)的THC。

还更优选地，CBD包含基于制品中大麻素的总量的约0.02％(w/w)至约0.05％(w/w)的THC。

在另外的实施方案中，反式-THC和顺式-THC的混合物以约3.6:1的反式-THC:顺式-THC的比存在。

更优选地，反式-THC和顺式-THC的混合物以约0.8:1的反式-THC:顺式-THC的比存在。

在另外的实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.1％(w/w)至约0.15％(w/w)的CBD-C1。

在另外的实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.2％(w/w)至约0.8％(w/w)的CBDV。

在另外的实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.3％(w/w)至约0.4％(w/w)的CBD-C4。

优选地，被治疗的与癫痫相关的共病是以下中的一种或更多种：注意力/集中；羞耻感；一般健康；语言和社交活动。

更优选地，与癫痫相关的共病独立于癫痫发作减少被改善。

在另外的实施方案中，癫痫是治疗耐受性癫痫(TRE)。

优选地，治疗耐受性癫痫是以下中的一种：Dravet综合征；肌阵挛-失神性癫痫；Lennox-Gastaut综合征；原因不明的全身性癫痫；CDKL5突变；Aicardi综合征；结节性硬化复合症；双侧多小脑回畸形；Dup15q；SNAP25；和发热感染相关性癫痫综合征(FIRES)；良性罗兰多癫痫；青少年肌阵挛性癫痫；婴儿痉挛(West综合征)和Landau-Kleffner综合征。

优选地，CBD的剂量在5mg/kg/天和50mg/kg/天之间。

根据本发明的第二方面，提供了一种治疗与癫痫相关的生活品质的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用用于治疗与癫痫相关的生活品质领域的大麻二酚(CBD)制品，其中CBD制品包含大于或等于98％(w/w)的CBD和小于或等于2％(w/w)的其他大麻素，其中小于或等于2％(w/w)的其他大麻素包括大麻素四氢大麻酚(THC)；大麻二酚-C1(CBD-C1)；次大麻二酚(CBDV)；以及大麻二酚-C4(CBD-C4)，并且其中THC作为反式-THC和顺式-THC的混合物存在。

特别地，受试者是人类。可选择地，受试者是动物。优选地，动物是狗。

附图简述

参考附图，在下文中进一步描述本发明的实施方案，在附图中：

图1示出了在开放标签癫痫发作研究中症状领域的主成分分析(principalcomponent analysis)；

图2示出了在随机对照试验中症状领域的主成分分析；和

图3示出了在癫痫的大鼠模型中癫痫发作指数比率和认知表现之间的相关性。

定义

用于描述本发明的一些术语的定义在下文详述：

本申请中描述的大麻素及其标准缩写在下文列出。

表1.大麻素及其缩写

上表并不是穷举的，并且仅详述了在本申请中识别的大麻素以供参考。迄今，已经识别出超过60种不同的大麻素，并且这些大麻素可以被分为如下的不同组：植物大麻素(Phytocannabinoid)；内源性大麻素(Endocannabinoid)和合成大麻素(其可以是新型大麻素或合成产生的植物大麻素或内源性大麻素)。

“植物大麻素”是源于自然界的大麻素并且可以存在于大麻属植物中。植物大麻素可以从植物分离以产生高度纯化的提取物或者可以通过合成再生。

“高度纯化的大麻素提取物”被定义为已经从大麻属植物中提取并且纯化到以下程度的大麻素：与大麻素共同提取的其他大麻素和非大麻素组分已经被大体上去除，使得高度纯化的大麻素大于或等于98％(w/w)纯。

“合成大麻素”是具有大麻素或大麻素样结构并且使用化学手段而不是由植物制造的化合物。

取决于用于提取大麻素的方法，植物大麻素可以作为中性(脱羧形式)或羧酸形式获得。例如，已知加热羧酸形式将引起大多数羧酸形式脱羧成中性形式。

“治疗耐受性癫痫”(TRE)或“顽固性癫痫”根据2009年的ILAE指南被定义为通过一种或更多种AED的试验不能充分控制的癫痫。

“儿童期癫痫”是指可能发生以在儿童期引起癫痫的许多不同的综合征和遗传突变。这些中的一些的实例如下：Dravet综合征；肌阵挛-失神性癫痫；Lennox-Gastaut综合征；原因不明的全身性癫痫；CDKL5突变；Aicardi综合征；结节性硬化复合症；双侧多小脑回畸形；Dup15q；SNAP25；和发热感染相关性癫痫综合征(FIRES)；良性罗兰多癫痫；青少年肌阵挛性癫痫；婴儿痉挛(West综合征)和Landau-Kleffner综合征。上文的清单并不是穷举的，因为存在许多不同的儿童期癫痫。

“癫痫共病”是指除癫痫之外发生的疾病或状况。这些包括以下：医学疾病或状况：肌肉骨骼系统紊乱；胃肠和消化紊乱；呼吸系统紊乱；慢性疼痛紊乱；脑血管意外；偏头痛；瘤形成；关节炎；风湿病；肥胖；糖尿病；感染；骨折和过敏。精神疾病或状况：抑郁症；焦虑；孤独症谱系紊乱；发作间期焦虑紊乱；癫痫的发作间期行为综合征和精神病。认知疾病或状况：注意缺陷多动障碍；学习障碍；智力迟钝；阿尔茨海默病和痴呆症。

“生活品质(QOL)测量”是由患者或患者护理人员进行的问卷或调查，问题涉及他们的状况如何影响他们的生活品质。这些被用于监测疾病对患者生活的影响，并确定治疗是否能够改善此类领域。

详述

高度纯化的CBD提取物的制备

以下描述了在下文的实施例中使用的具有已知且恒定的组成的植物来源的纯化的CBD的产生。

总之，所使用的药物物质是大麻(Cannabis sativa L.)的高CBD含量化学型的液体二氧化碳提取物，该提取物通过溶剂结晶方法被进一步纯化以得到CBD。结晶过程特定地去除了其他大麻素和植物组分以得到大于98％的CBD。尽管CBD是高度纯化的，但是因为它是从大麻属植物产生而不是合成产生的，所以存在与CBD共同产生和共同提取的少量的其他大麻素。这些大麻素的细节以及它们存在于药物中的量如下：

在一些实施方案中，CBD制品包含四氢大麻酚(THC)。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的高达约1％、约2％、约3％、约4％或约5％的THC。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的不超过0.15％的THC。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.01％至约0.1％的THC。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.02％至约0.05％的THC。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的至少约0.1％的THC。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的至少约0.02％的THC。在一些实施方案中，THC包括Δ9-THC。

在一些实施方案中，THC作为不同异构体的混合物存在。在一些实施方案中，THC包括反式-THC和顺式-THC。在一些实施方案中，反式-THC和顺式-THC以约5:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，反式-THC和顺式-THC以约3.5:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，反式-THC和顺式-THC以约2:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，反式-THC和顺式-THC以约1:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，反式-THC和顺式-THC以约0.8:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在。

在一些实施方案中，顺式-THC作为(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC的混合物存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约20:1至1:20((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约15:1至1:15((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约10:1至1:10((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约9:1至1:9((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约5:1至1:5((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约3:1至1:3((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约2:1至1:2((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约1:1((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。在一些实施方案中，(-)-顺式-THC和(+)-顺式-THC以约9:1((-)-顺式-THC:(+)-顺式-THC)的比存在。

在一些实施方案中，CBD制品包含一种或更多种不同于THC的大麻素。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的不超过2％的不同于CBD的大麻素。

在一些实施方案中，CBD制品包含次大麻二酚(CBDV)。在一些实施方案中，CBDV包括(-)-反式-CBDV异构体(isoform)。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.2％至约0.8％的CBDV。

在一些实施方案中，CBD制品包含CBD-C4(CBD-C4)。在一些实施方案中，CBD-C4包括(-)-反式-CBD-C4异构体。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.3％至约0.4％的CBD-C4。

在一些实施方案中，CBD制品包含CBD-C1(CBD-C1)。在一些实施方案中，CBD-C1包括(-)-反式-CBD-C1异构体。在一些实施方案中，CBD制品包含基于制品中大麻素的总量的约0.1％至约0.15％的CBD-C1。

在一些实施方案中，存在于CBD制品中的至少一种大麻素的至少一部分从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，存在于CBD制品中的CBD的至少一部分从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，存在于CBD制品中的THC的至少一部分从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，存在于CBD制品中的至少一种大麻素的大体上全部从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，存在于CBD制品中的大体上全部的CBD从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，存在于CBD制品中的大体上全部的THC从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，存在于CBD制品中的大体上全部的大麻素从大麻属植物材料中分离。在一些实施方案中，大麻属植物材料来自大麻(Cannabis sativa)、印度大麻(Cannabisindica)或莠草大麻(Cannabis ruderalis)植物。在一些实施方案中，大麻属植物是高CBD含量的大麻属化学型。在一些实施方案中，大麻属植物是大麻的高CBD含量的大麻属化学型。在一些实施方案中，大麻属植物材料包含基于制品中大麻素的总量的约5％至约20％的CBD。在一些实施方案中，大麻属植物材料包含基于制品中大麻素的总量的约10％至约15％的CBD。在一些实施方案中，大麻属植物材料包含以约3.5:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在的反式-THC和顺式-THC。在一些实施方案中，大麻属植物材料包含以约0.8:1(反式-THC:顺式-THC)的比存在的反式-THC和顺式-THC。

实施例1：开放标签研究数据的主成分分析(PCA)

主成分分析(PCA)是一种统计学程序，它使用正交变换将一组可能相关的变量的观察结果转换成一组线性不相关变量的值，称为主成分。

这种变换以这样的方式定义，第一主成分具有最大的可能方差(尽可能多地解释数据的可变性)，并且每个后续成分又在与前面的成分正交的约束下具有最高的可能方差。

PCA是一种将数据群体之间的相关性可视化的有用工具，并且在本实施例中用于确定患有治疗耐受性癫痫的患者在大麻二酚(CBD)的开放标签研究期间被改善的症状领域。

材料和方法

用从大麻属植物获得的大麻二酚(CBD)的高度纯化的提取物对患有严重的、儿童期发作的治疗耐受性癫痫(TRE)的儿童和年轻成人进行了测试。该研究的参与者是CBD的拓展性准入同情使用项目的一部分。

所有患者都进入4周的基线时间段，此时父母/护理人员记录前瞻性的癫痫发作日记，记录所有可计数的运动性癫痫发作类型。

然后，除了基线抗癫痫药物(AED)方案之外，患者还接受芝麻油中具有已知且恒定的组成的高度纯化的CBD提取物(大于98％w/w的CBD)，以5mg/kg/天的剂量。

日剂量逐渐增加2mg/kg至5mg/kg的增量，直到出现不耐受性或达到50mg/kg/天的最大剂量。

以2-4周的规律间隔观察患者。在研究的整个12周内，在基线和以规律的间隔进行血液、肝、肾功能和伴随AED水平的实验室测试。

儿童期癫痫的生活品质(QOLCE)调查用于测量多个QOL领域。护理人员在基线时和在治疗的12周之后完成调查。QOLCE问卷评估了91个项目，分为五个子领域：身体功能；认知功能；情绪健康；社交功能和行为。还记录了一般健康。

对所收集的QOLCE数据和癫痫发作的减少进行PCA，以确定参与者是由于癫痫发作的减少而在QOL的某些领域中经历了减少，或是独立于通过癫痫发作减少对研究药物的响应而存在QOL领域的减少。

结果

图1详述了从QOLCE调查中获得的数据的主成分分析。

在F1轴线上的零点右侧绘制的QOL领域是那些相比于基线显示出改善的领域。相反，在F1轴线上的零点左侧绘制的QOL领域是那些相比于基线测量没有改善的领域。

在F2轴线上的零点上方绘制的QOL领域是那些在经历癫痫发作的减少的参与者中得到改善的领域，并且在F2轴线上的零点下方绘制的QOL领域是尽管癫痫发作减少但得到改善的领域。

下面的表2另外详述了观察结果的百分比贡献，并且表3提供了观察结果的余弦平方。

表2：观察结果的百分比贡献

表3：观察结果的余弦平方

这些数据表明，在与生活品质相关的几个领域(F1轴线的零的右侧)中看到改善。这些领域是：注意力和集中；QOL项目；精力/疲劳；控制/无助和羞耻感。

在没有癫痫发作的改善的情况下，在控制/无助和羞耻感领域，令人惊讶地观察到改善(双标的右下角区域)。

结论

发现与生活品质相关的几个领域的改善。这些关键领域的改善将使患者能够享受更好的生活品质。在与癫痫发作的减少无关的这些领域中的几个领域中看到改善的事实意味着，尽管药物对这些患者的癫痫发作的减少无效，但他们享受到生活品质的改善。考虑到这些患者是治疗耐受性的并且在研究之前已经尝试过至少三种抗癫痫药物且都失败了，这是特别令人惊讶的。

实施例2：随机对照试验汇总研究数据的主成分分析(PCA)

如上文的实施例1中描述的，PCA是核对具有几个变量的数据的有用工具。对使用从三项随机对照临床试验汇总的数据产生的数据进行类似的分析，这三项随机对照临床试验是针对患有与Dravet综合征(一项试验)和Lennox-Gastaut综合征(LGS)(两项试验)相关的治疗耐受性癫痫的儿童和年轻成人。

材料和方法

在CBD作为用于与LGS相关的癫痫发作的治疗的两项安慰剂对照研究中，在被定义为治疗耐受性的患者中，大麻二酚(CBD)被用作附加治疗。患者先前尝试过并停止使用平均6种AED，并且正维持平均3种AED。

第一项研究是大麻二酚口服溶液(CBD-OS)相对于安慰剂的1:1随机双盲14周比较。治疗期由两周的滴定期(titration period)，随后12周的维持期组成。治疗期之后是10天的减量期(taper period)和4周的随访期。该研究旨在确定20mg/kg/天的大麻二酚与安慰剂相比的效力、安全性和耐受性。

第二项研究是两种剂量水平的大麻二酚(10mg/kg/天和20mg/kg/天)相对于安慰剂的1:1:1随机双盲14周比较。治疗期由两周的滴定期，随后12周的维持期组成。治疗期之后是10天的减量期和4周的随访期。该研究旨在确定两种剂量水平的CBD-OS与安慰剂相比的效力、安全性和耐受性。将安慰剂组的患者分成两个等同的队列；一半接受10mg/kg/天的给药体积，并且一半接受20mg/kg/天的给药体积。

在CBD作为用于与Dravet综合征相关的癫痫发作的治疗的安慰剂对照研究中，在被定义为治疗耐受性的患者中，CBD被用作附加治疗。该研究是大麻二酚口服溶液(CBD-OS)相对于安慰剂的1:1随机双盲14周比较。治疗期由两周的滴定期，随后12周的维持期组成。治疗期之后是10天的减量期和4周的随访期。该研究旨在确定20mg/kg/天的大麻二酚与安慰剂相比的效力、安全性和耐受性。

儿童期癫痫的生活品质(QOLCE)调查被用于测量多个QOL领域。护理人员在基线时和在治疗的12周之后完成调查。QOLCE问卷评估了91个项目，分为五个子领域：身体功能；认知功能；情绪健康；社交功能和行为。还记录了一般健康。

结果

图2详述了从QOLCE调查中获得的数据的主成分分析。

如实施例1中描述的，将显示出QOL领域改善的领域绘制在F1轴线的零的右侧，并且在F2轴线的零点上方发现癫痫发作额外减少的领域。

下面的表4另外详述了观察结果的百分比贡献，并且表5提供了观察结果的余弦平方。

表4：观察结果的百分比贡献

表5：观察结果的余弦平方

如可以看到的，与实施例1相比，在与生活品质相关的另外的领域中看到改善。这些领域是生活品质项目；一般健康；社交互动；社交活动；注意力/集中；整体生活品质；记忆力；语言；控制/无助；羞耻感和认知。

此外，令人惊讶地，尽管患者未经历他们的癫痫发作负担的改善，但QOL的一些领域改善。观察到这样的改善的领域是：记忆力；语言；控制/无助；羞耻感和认知。

结论

如实施例1中描述的拓展性准入数据所表明的，这些数据来自对患有Dravet综合征和Lennox-Gastaut综合征的患者进行的CBD的随机对照临床试验，在不包括癫痫发作减少的特定QOL领域中存在改善。

在患有癫痫的患者中，癫痫发作负担通常不是该疾病最具破坏性的部分。对于患有癫痫综合征的患者和他们的护理人员来说，某些QOL领域(诸如语言和记忆力)的减少可能是痛苦的。尽管仍然经历癫痫发作，但这些领域的改善使患者和他们的护理人员能够过上更正常的生活。

实施例3：随机对照试验LENNOX-GASTAUT研究数据的生物统计学分析

生物统计学分析是统计学对广泛的生物学话题的应用，特别是医学生物统计学，它排他性地关注于医学和健康。

下面的实施例使用生物统计学分析来寻找QOL数据的趋势，这些数据在患有Lennox-Gastaut综合征的患者中进行的大麻二酚的随机对照试验中收集。

方法

该研究是大麻二酚口服溶液(CBD-OS)相对于安慰剂的1:1随机双盲14周比较。治疗期由两周的滴定期，随后12周的维持期组成。治疗期之后是10天的减量期和4周的随访期。该研究旨在确定20mg/kg/天的大麻二酚与安慰剂相比的效力、安全性和耐受性。

儿童期癫痫的生活品质(QOLCE)调查被用于测量多个QOL领域。护理人员在基线时和在治疗的12周之后完成调查。QOLCE问卷评估了91个项目，分为五个子领域：身体功能；认知功能；情绪健康；社交功能和行为。还记录了一般健康。

结果

下面的表6详述了没有变化(由

表6.QOL分量表评分相对于安慰剂的生物统计学分析

如可以看到的，在记忆力和语言的QOL领域中，存在高于基线的显著增加。这与实施例2中的汇总数据分析中发现为被改善的领域一致。

有趣的是，没有生活品质下降的领域。

结论：

在本实施例中提供的数据支持语言和记忆力的QOL领域的改善。对较小的一组数据的这种分析为患有Lennox-Gastaut综合征的患者的特定QOL领域的改善提供了强有力的支持证据。

实施例4：开放标签研究数据的病例研究分析

实施例1至实施例3详述了患有Dravet综合征和Lennox-Gastaut综合征的患者的特定生活品质领域的改善。

本实施例提供了关于另外的癫痫综合征的另外的数据，这些另外的癫痫综合征作为实施例1中描述的拓展性准入项目的一部分被研究。

方法

用从大麻属植物获得的大麻二酚(CBD)的高度纯化的提取物对患有严重的、儿童期发作的治疗耐受性癫痫(TRE)的儿童和年轻成人进行了测试。该研究的参与者是CBD的拓展性准入同情使用项目的一部分。

所有患者都进入4周的基线时间段，此时父母/护理人员记录前瞻性的癫痫发作日记，记录所有可计数的运动性癫痫发作类型。

然后，除了基线抗癫痫药物(AED)方案之外，患者还接受芝麻油中具有已知且恒定的组成的高度纯化的CBD提取物(大于98％w/w的CBD)，以5mg/kg/天的剂量。

日剂量逐渐增加2mg/kg至5mg/kg的增量，直到出现不耐受性或达到50mg/kg/天的最大剂量。

以2-4周的规律间隔观察患者。在研究的整个12周内，在基线和以规律的间隔进行血液、肝、肾功能和伴随AED水平的实验室测试。

生活品质由医生、父母/护理人员或两者记录，并且通过每次访视时的以下量度表示：非常糟；糟得多；较糟；无变化；略微改善；很大改善或非常大改善。

结果

下面的表7详述了在开放标签研究中，在研究期结束时(在12周和108周之间之后)从患有癫痫综合征的患者获得的结果。

表7.作为开放标签研究的一部分，在患有癫痫综合征的患者中记录的QOL量度

如表7中观察到的，被诊断为患有结节性硬化症；CDKL5；Sturge Weber；Doose综合征；天使综合征(Angelman综合征)；SNAP25；发热感染相关性癫痫综合征(FIRES)；DUP15Q和Aicardi综合征的患者的生活品质存在可观察到的改善。

在记录了数据的39名患者中，34名患者提供了阳性响应(略微改善；很大改善或非常大改善)。这样的数据，虽然经由开放标签方式收集并因此产生偏倚，但提供了以下证据：除了更彻底研究的Dravet综合征和Lennox-Gastaut综合征之外，另外的癫痫综合征的生活品质也得到改善。

结论

在实施例中提供的数据表明，生活品质量度的改善并不局限于特定的癫痫综合征，并且在患有各种不同的儿童期发作的治疗耐受性癫痫综合征的患者群体中被看到。

实施例5：大麻二酚在大鼠的认知表现中的效力

先前已经示出，CBD可以恢复表现出自发性反复癫痫发作的大鼠的恶化的认知表现。然而，CBD也提高了这些动物的癫痫发作率。

为了理解认知表现的改善是否仅仅是由于CBD的癫痫发作严重程度降低的结果，在本实施例中，经由皮尔逊相关系数来评估癫痫发作评分和行为表现之间的相关性。

方法

癫痫的诱发

使用在雄性Wistar大鼠(Harlan Envigo,UK；年龄：P21-28；重量>70g)中锂-匹鲁卡品诱发的癫痫的强度降低的癫痫持续状态(RISE)形式。

将动物保持在12h:12h的黑暗:光照周期，21℃的室温和50±10％的湿度，在整个研究期随意获取食物和水。在本研究中，仅使用从诱发日起4-8周内被归类为癫痫的动物，以最小化任何年龄相关的可变性。

研究设计

为了了解癫痫发作负担和认知表现之间是否存在相关性，以及CBD对这种关系的影响，将20只癫痫大鼠分为两组，其中将10只动物用在饮用水中的200mg/kg CBD治疗持续6周，并且10只动物仅接受媒介物(3.5％

还添加了一组10只经媒介物处理的健康大鼠。在行为实验期间(药物治疗的第7周和第8周)，继续药物/媒介物处理。

药物和化学品

在实验中使用植物来源的高度纯化的CBD(>98％w/w)。

癫痫发作的视频监测和行为评估

对所有动物每天24小时进行视频监测持续整个6周的研究期。建立20台CCTV摄像机(T(TP-101BK,Topica,中国台湾地区)，并连接到PC，使用Zoneminder(v1.2.3；TriornisLtd.,Bristol,UK)软件记录视频片段。

从最初的4天(治疗开始时)到最后的4天(行为实验开始前)在光照阶段(07:00至19:00)期间获得的视频片段被离线编码以分析大鼠的行为。

训练盲的独立研究人员，以使用改良的Racine量表识别和编码惊厥行为。记录≥3的评分并将其纳入结果，因为这些评分反映了可清晰识别的运动性惊厥。

此后，通过将每个严重程度评分(以Racine量表)乘以观察期期间的相应频率(出现次数)来计算动物的癫痫发作指数。

癫痫发作指数比率通过使用以下公式由癫痫发作指数计算：癫痫发作率＝(最终统计堆栈(bin)中的平均癫痫发作指数)/(第一统计堆栈中的平均癫痫发作指数)。因此，较高的癫痫发作率指示疾病的恶化。

认知功能评估

安装在地板上方72cm的桌子上的由Plexiglas制成的孔板设备(70×70×45cm)被用于评估动物的认知功能。该设备由地板上间隔相等的16个孔组成，每个孔的直径为2.5cm。将每只大鼠放置在孔板的中心，并且允许其自由探索该设备10min。

四个易接近的诱饵被保存在四个孔中，每只动物随机选择，但在所有测试日保持不变。通过在所有其他孔内放置不可接近的诱饵，嗅觉提示失效。

在测试开始之前，将动物习惯孔板四天(两天没有诱饵以使动物习惯于测试场地，随后两天有诱饵以使动物习惯任务规则)。在开始测试前，在测试日动物被剥夺食物4-5小时，以增强完成任务的动力。

进行测试持续连续三天，每天对动物进行五次试验。由摄像机记录头部倾斜，用于后续分析。当头部被引入孔中至少达到啮齿动物的眼睛水平时，头部倾斜被评分。

错误包括：头部倾斜进从未给诱饵的孔(参考记忆错误)或再次倾斜进已给诱饵的孔(工作记忆错误)。动物在三天的测试中出现的参考记忆错误和工作记忆错误的总数被用作认知表现的量度。对每只动物计算15次试验的参考记忆错误和工作记忆错误的平均数。

统计学分析

使用皮尔逊相关系数评估每只动物的癫痫发作指数与参考记忆错误和工作记忆错误的次数之间的线性相关性，皮尔逊相关系数具有在+1和-1之间的值，其中+1是总正相关，并且-1是总负相关。

注意到，相关性反映了线性关系的非线性和方向，而不是该关系的斜率，也不是非线性关系的许多方面。在所有情况下，p<0.05被认为是显著的。

结果

图3详述了在孔板测试中癫痫发作指数比率和认知表现之间的相关性。

在图A中，在经媒介物处理的大鼠中发现癫痫发作指数比率和参考记忆错误次数之间没有显著相关性(R2＝0.05533，p＝0.05749，n＝8)。

在图B中，在经媒介物处理的大鼠中癫痫发作指数比率与工作记忆错误次数不显著相关(R2＝0.03884，p＝0.6399，n＝8)。

在图C中，在经CBD处理的大鼠中参考记忆错误次数与癫痫发作指数比率不显著相关(R2＝0.2486，p＝0.2085，n＝8)。

在图D中，在经CBD处理的动物中，工作记忆错误和癫痫发作指数比率之间没有显著相关性(R2＝0.04755，p＝0.6039，n＝8)。

结论

相关性分析示出，由经媒介物处理的RISE-SRS大鼠和经CBD处理的RISE-SRS大鼠两者表现的癫痫发作负担和认知表现之间不存在线性关系。

这表明CBD对癫痫发作负担和认知表现的有益作用是相互独立的。

总结论

综上所述，来自本文提供的五个实施例的数据提供了植物来源的高度纯化的CBD在改善生活品质方面的效力的证据。

特别地，在包括注意力/集中；羞耻感；一般健康；语言和社交活动的特定QOL领域中观察到改善。

这种改善被认为是独立于癫痫发作的减少而观察到的，这表明益处是这些特定领域的实际改善，而不是由于患者遭受较少的癫痫发作而得到改善。