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基因敲入方法、基因敲入细胞制作方法、基因敲入细胞、癌变风险评价方法、癌细胞制造方法和用于在它们中使用的试剂盒

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摘要

一种基因敲入方法，是向基因组DNA的靶部位敲入外源性DNA的方法，包括向细胞导入包含所述外源性DNA的供体DNA以及以Cas9蛋白质和其向导RNA作为构成要素的CRISPR－Cas9系统的工序，所述供体DNA从5’侧依次包含由可通过微同源介导的连接与所述基因组DNA的所述靶部位的5’侧的第1核苷酸序列连接的第1’核苷酸序列构成的5’－微同源区域、所述外源性DNA、由可通过微同源介导的连接与所述基因组DNA的所述靶部位的3’侧的第2核苷酸序列连接的第2’核苷酸序列构成的3’－微同源区域，所述CRISPR－Cas9系统是如下系统：将所述基因组DNA中的所述靶部位与第1核苷酸序列之间的第1被切断区域以及所述靶部位与第2核苷酸序列之间的第2被切断区域切断，并且将所述供体DNA中的所述5’－微同源区域的5’侧的第3被切断区域、所述外源性DNA与所述5’－微同源区域之间的第4被切断区域、所述外源性DNA与所述3’－微同源区域之间的第5被切断区域以及所述3’－微同源区域的3’侧的第6被切断区域切断；在所述基因组DNA的第1核苷酸序列与第2核苷酸序列之间插入所述外源性DNA。

著录项

  • 公开/公告号CN113574175A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-10-29

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 IMRA日本公司;

    申请/专利号CN202080004117.0

  • 发明设计人 片山翔太;

    申请日2020-10-16

  • 分类号C12N15/113(20100101);C12N9/22(20060101);C12N15/85(20060101);C12N15/90(20060101);C12N5/10(20060101);C12Q1/6886(20180101);

  • 代理机构11227 北京集佳知识产权代理有限公司;

  • 代理人金世煜;李书慧

  • 地址 日本北海道

  • 入库时间 2023-06-19 13:02:24

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2022-04-08

    专利申请权的转移 IPC(主分类):C12N15/113 专利申请号:2020800041170 登记生效日:20220328 变更事项:申请人 变更前权利人:IMRA日本公司 变更后权利人:株式会社爱信 变更事项:地址 变更前权利人:日本北海道 变更后权利人:日本爱知县刈谷市

    专利申请权、专利权的转移

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