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一种绝对定量细胞内DNA双链断裂数量的方法及应用

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本发明公开了一种绝对定量细胞内DNA双链断裂数量的方法及应用。该方法将带有末端修饰的外源核苷酸片段插入至固定细胞基因组DNA双链断裂处，然后将基因组片段化并连接衔接接头，针对外源核苷酸片段和衔接接头设计特异性PCR引物和特异性荧光探针，结合细胞内参基因，构建数字液滴PCR体系，定量细胞内DNA双链断裂数量。本发明使得检测DNA双链断裂摆脱了序列依赖性，广泛适用于绝对精准定量动植物内因疾病、辐射、药物或者基因编辑等各种原因造成的DNA双链断裂数量，可用作检测射线损伤、化学药物损伤、基因编辑脱靶效率等问题的有效工具，在分子生物学和临床诊断中具有非常广阔的应用前景。

著录项

公开/公告号CN114032292A

专利类型发明专利
公开/公告日2022-02-11

原文格式PDF
申请/专利权人北京大学;
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申请/专利号CN202111549726.7
发明设计人牛佳浩;王尧;孙育杰;
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申请日2021-12-17
分类号C12Q1/6851(20180101);C12Q1/6855(20180101);
代理机构11360 北京万象新悦知识产权代理有限公司;
代理人李稚婷
地址 100871 北京市海淀区颐和园路5号
入库时间 2023-06-19 14:11:11

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2022-03-01

实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q 1/6851 专利申请号:2021115497267 申请日:20211217

实质审查的生效

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3. Process for determining the presence and / or the quantity of microorganisms and / or the quantity of microorganisms and / or its intracellular material present in a sample device to detect MicroorganisMOS and kit tests for the detection and quantification of microorganisms and / or ADP reagent. [P] . BR9406417A . 1995-12-26

机译：确定用于检测MicroorganisMOS的样品设备中存在的微生物和/或微生物的数量和/或微生物和/或其细胞内物质的数量的过程以及用于检测和定量微生物和/或试剂的试剂盒测试的方法ADP试剂。
4. "Method for the relative quantification of at least one target nucleic acid in a sample, method for absolute quantification of at least one target nucleic acid in a sample, method for determining the value of at least one target nucleic acid in a sample, means machine readable equipment and nucleic acid sample analysis equipment " [P] . BRPI1006682A2 . 2016-04-12

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