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一种采用少量简并引物全面扩增humanTCRβ链文库的制备方法

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本发明提供一种采用少量简并引物全面扩增humanTCRβ链文库的制备方法，涉及免疫组库测序文库的扩增制备技术领域。淋巴细胞裂解和总RNA提取：步骤一、将样本预处理后，进行RNA提取；步骤二、逆转录：对获得的淋巴细胞的总RNA进行逆转录，获得cDNA；步骤三、多重PCR：通过对cDNA进行第一轮PCR和第二轮PCR，对cDNA的TCRβ链基因进行特异性扩增；步骤四、添加测序接头序列及index，构建文库较短，但包含完整的CDR3区段，可以获得更高的通量，更低的价格，每条特异性引物的添加量与扩增体系都是经过大量实验优化后确定的，本发明可以极大降低引物二聚体的数量，获得高质量文库。

著录项

公开/公告号CN114107287A

专利类型发明专利
公开/公告日2022-03-01

原文格式PDF
申请/专利权人云测智能科技有限公司;
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申请/专利号CN202111522460.7
发明设计人张翼冠;赵海洋;魏平;
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申请日2021-12-13
分类号C12N15/10(20060101);C40B50/06(20060101);C12Q1/686(20180101);C12N15/11(20060101);
代理机构51270 成都瑞创华盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙);
代理人邓瑞;张敏
地址 610000 四川省成都市成都高新区盛邦街88号8栋15楼24号
入库时间 2023-06-19 14:22:08

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2022-03-01

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发明专利申请公布

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1. 一种采用少量简并引物全面扩增humanTCRβ链文库的制备方法 [P] . 中国专利： CN114107287A . 2022-03-01
2. 一种基于简并引物组合扩增长江鱼类线粒体基因全序的方法及其应用 [P] . 中国专利： CN107557478A . 2018-01-09
3. methods of producing a library of eukaryotic cell clones, method of producing a diverse repertoire of ligands, screening method for a cell of a desired phenotype, screening method for a target-recognizing ligand, library, in vitro library of eukaryotic cell clones, eukaryotic cell-containing container, use of a site-specific nuclease, library uses, method for converting single chain antibody (scfv) populations to immunoglobulin (ig) or fragment, and method for reformatting of any two dna elements attached to a vector [P] . BR112016025352A2 . 2017-10-17

机译：真核细胞克隆文库的制备方法，各种配体库的制备方法，所需表型细胞的筛选方法，靶标识别配体的筛选方法，文库，真核细胞克隆的体外文库，真核细胞容器，位点特异性核酸酶的使用，文库用途，将单链抗体（scfv）群体转化为免疫球蛋白（ig）或片段的方法以及将与载体连接的任意两个dna元素重新格式化的方法
4. A process for isolating and purifying vasopeptidase-inhibiting peptides with specificity for the angiotensin-converting enzyme carboxylic site secreted by snake venom glands (bpps), particularly jararaca bothrops, or endogenously produced (evasins) having vasodilatory and anti- hypertensive; process of determining the starch sequence of inhibitor peptides secreted by the snake venom (bpps) or endogenous (evasin) venom; The process of determining the amino acid sequence of bpps by deducting the cdna from precursors of these molecules expressed in snake tissues, specifically bothrops jararaca. process of determining the amino acid sequence of evasins by deducing cdna from precursors of these molecules expressed in snake tissues, specifically bothrops jararaca, process of amplifying cdna from pancreatic and / or snake brain cdna libraries, specifically bothrops jararaca ; solid phase synthesis process of vasopeptidase inhibiting peptides with vasodilating and antihypertensive action, vaso [P] . BR0101088A . 2003-03-18

机译：一种分离和纯化具有对蛇毒腺（bpps），特别是贾拉卡双峰植物分泌的或具有血管扩张和抗高血压作用的内源性（evasins）分泌的血管紧张素转化酶羧基位点具有特异性的血管肽酶抑制肽的方法;确定蛇毒（bpps）或内源性（evasin）毒液分泌的抑制剂肽的淀粉序列的过程;通过从蛇组织中表达的这些分子的前体中减去cdna来确定bpps氨基酸序列的过程，尤其是杂种植物。通过从在蛇组织中表达的这些分子的前体推导cdna来确定evasins氨基酸序列的过程，特别是在蛇和蛇脑cdna文库中扩增cdna的过程，尤其是在蛇和草cdna文库中;血管肽酶抑制肽具有血管舒张和降压作用的固相合成方法
5. A process for preparing surfactants of amine oxide of a long chain with only a low content of nitrite, nitrosamine and residual peroxide. [P] . ES2228140T3 . 2005-04-01

机译：一种仅具有少量亚硝酸盐，亚硝胺和残留过氧化物的长链氧化胺表面活性剂的制备方法。