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一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株

摘要

本发明公开了一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株,属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将来源于Capitella teleta的透明质酸水解酶基因克隆连接到酿酒酵母整合表达载体pRS305,通过将启动子置换,添加信号肽,在基因N端添加氨基酸短肽等手段,获得质粒pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase,并转化酿酒酵母宿主S.cerevisiae CEN.PK2‑1C,从而构建高产透明质酸水解酶的重组菌株命名为S.cerevisiae CEN.PK2‑1C‑pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase。在3L罐中,重组S.cerevisiae菌株胞外表达的透明质酸水解酶的活力可达1.26×106U/mL,相比重组菌株S.cerevisiae pRS305‑HAase的胞内酶活2.05×105U/mL,提高了5.1倍。本发明利用酿酒酵母为宿主发酵得到的透明质酸水解酶对透明质酸具有高选择性和高活力,具有重要的应用前景。

著录项

  • 公开/公告号CN108949603B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2020-08-04

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 江南大学;

    申请/专利号CN201811172714.5

  • 发明设计人 康振;黄浩;堵国成;王阳;

    申请日2018-10-09

  • 分类号C12N1/19(20060101);C12N15/81(20060101);C12N15/66(20060101);C12R1/865(20060101);

  • 代理机构23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司;

  • 代理人张勇

  • 地址 214000 江苏省无锡市蠡湖大道1800号

  • 入库时间 2022-08-23 11:07:55

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-08-04

    授权

    授权

  • 2019-01-01

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N1/19 申请日:20181009

    实质审查的生效

  • 2018-12-07

    公开

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