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一种CRISPR/Cpf1系统介导的以RNA转录本为修复模板的同源重组方法

摘要

本发明公开了一种CRISPR/Cpf1系统介导的以RNA转录本为修复模板的同源重组方法。本发明以水稻ALS基因为研究对象,构建了同源重组载体。将RCR1‑RCR2‑RDR片段进行体外转录,通过RNP方法,以RNA转录本作为修复模板,在水稻愈伤中实现了目的基因的同源重组修复。同时,利用基因枪方法将载体导入水稻愈伤中,获得了ALS基因定点修饰的水稻植株。结果表明,以RNA作为修复模板可成功介导目的基因的同源重组,为农作物育种提供了新思路,因此在农业育种方面具有强大的应用潜力。

著录项

  • 公开/公告号CN108707621B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-02-12

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 中国农业科学院作物科学研究所;

    申请/专利号CN201810385845.5

  • 申请日2018-04-26

  • 分类号C12N15/82(20060101);C12N9/22(20060101);A01H5/00(20180101);A01H6/46(20180101);

  • 代理机构11245 北京纪凯知识产权代理有限公司;

  • 代理人关畅;秦梦楠

  • 地址 100081 北京市海淀区中关村南大街12号中国农业科学院作物科学研究所

  • 入库时间 2022-08-23 11:31:51

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