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引物末端酶解二聚体法PCR

摘要

引物末端酶解二聚体法PCR,其特征是采用3'最末端第1/2个碱基均为A/a腺嘌呤结尾的引物和底物dUTP/dU代替dTTP渗入PCR产物酶解污染策略;尿嘧啶‑DNA糖基化酶UDG酶解引物二聚体的缺/脱dU产物仍是引物结合模板,引物对3'最末a配对PD产物链脱dU处既缺碱基可匹配结合又无模板可复制;无a结尾引物须变一个3'末端RNA(rN)碱基以增加RNase酶解PD污染;使用eUDG、及RNaseH‑II和内切酶III‑VIII、限制内切酶消化前次或历次PCR产物气雾胶、靶交叉污染,联用中部同序引物减少内源PD产生,PCR成分加蔗糖分层缓释并矿物油封闭,热启动、热灭活不耐热酶。

著录项

  • 公开/公告号CN108085372B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-09-28

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 江洪;

    申请/专利号CN201810001086.8

  • 发明设计人 江洪;江雨康;

    申请日2018-01-02

  • 分类号C12Q1/6848(20180101);

  • 代理机构11930 北京百欧知识产权代理事务所(普通合伙);

  • 代理人吴泳历

  • 地址 246200 安徽省安庆市望江县牌坊路2号楼三单元3层

  • 入库时间 2022-08-23 12:33:41

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