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吡咯伯克霍尔德氏菌内切葡聚糖酶及其重组表达方法和应用

摘要

本发明公开从吡咯伯克霍尔德氏菌B1213克隆的内切葡聚糖酶基因,采用含有可溶性融合标签的pCold TF载体(使用TF)和cspA启动子成功得以表达。通过酶活性,SDS‑PAGE和酶谱分析成功地表达了带有或不带有信号肽的所述酶,其中切除信号肽更好。通过优化培养条件后,酶活性提高至未优化前的11.5倍。同时对该酶的酶学性质研究表明,该酶最适pH为6.0,最适反应温度为45℃;该酶在20‑35℃下保温半小时后残余酶活可达80%以上,且在pH5.5‑11.0环境中保温半小时后残余酶活保持在95%以上,具有极强的耐碱性,该酶具有很好的工业应用潜力。

著录项

  • 公开/公告号CN111647582B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-12-28

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 北京工商大学;

    申请/专利号CN202010558180.0

  • 发明设计人 范光森;孙宝国;胡晓晴;

    申请日2020-06-18

  • 分类号C12N9/42(20060101);C12N15/56(20060101);C12N15/70(20060101);C12N1/21(20060101);C12R1/19(20060101);

  • 代理机构11400 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙);

  • 代理人欧阳石文

  • 地址 100048 北京市海淀区阜成路33号

  • 入库时间 2022-08-23 12:52:35

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