一种治疗膝关节退行性病变的中药组合物及其应用

技术领域

本发明涉及中药组合物领域，具体地说，涉及一种治疗膝关节退行性改变引起的膝关节疼痛的中药组合物及其应用。

背景技术

膝关节退行性病变又称骨关节炎、骨关节病、退行性关节病、增生性关节炎病、肥大性关节炎、老年性关节炎等，是最常见的一种慢性、进展性关节疾病。其病理特点为关节软骨变性、破坏，软骨下骨硬化、关节边缘和软骨下骨反应性增生、骨赘形成。其临床表现为膝关节肿胀、疼痛、行走困难、站起和蹲下艰难。本病属中医“痹症”范畴，目前普遍认为年老肝肾亏虚，筋骨失养；长期劳损，血瘀气滞；风寒湿邪痹阻经络等三种因素杂至是本病发生发展的根本。膝关节退行性病变的治疗以保守治疗为主。可采用中药内服、中药熏洗、针灸、推拿、理疗、练功疗法等进行综合治疗。

专利文献CN103536777A，公开日2014.01.29，公开了一种治疗膝骨关节炎的中药组合物，其中药原料及重量份配比为：威灵仙5-25份、桑寄生5-25份、伸筋草5-25份、鸡血藤10-30份、川牛膝5-25份、木瓜10-30份、元胡5-25份、防风5-20份、羌活5-20份、独活5-20份、秦艽5-25份、白术5-25份、云苓5-25份、黄柏5-20份、苍术5-20份、当归5-25份、桂枝5-15份、天麻5-25份、徐长卿5-25份、三七5-15份和甘草5-15份。水煎服用。具有滋阴补肾、祛痰除风、消肿止痛、活血化瘀、强壮筋骨的功效，治疗膝骨关节炎疗效显著。

专利文献CN112274613A，公开日2021.01.29，公开了一种治疗膝关节骨性关节炎的中药组合物，由下述质量份的中药材组成：桂枝3-10份、艾叶3-10份、透骨草3-10份、徐长卿3-10份、羌活2-6份、独活3-10份、海桐皮2-6份、豨莶草2-6份、制川乌1.5-5份、三棱2-6份、莪术2-6份、苏木2-6份、伸筋草2-10份、泽兰2-6份、威灵仙5-10份、细辛1-5份、片姜黄4-10份、制草乌1-5份。使用时将各组分研磨成粉，煎煮成药汁用于熏蒸。用于治疗膝关节骨性关节炎，缓解其疼痛、水肿。

然而，开发药少效专的中药组合物仍然是十分必要的。目前未见如本申请针对膝关节退行性病变疗效显著，且药味组成少的中药组合物。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种治疗膝关节退行性病变的中药组合物。

本发明的另一目的是，提供所述中药组合物的用途。

本发明的再一目的是，提供一种治疗膝关节退行性病变的护膝包。

为解决上述第一个技术问题，本发明采取的技术方案是：

一种治疗膝关节退行性病变的中药组合物，所述中药组合物由以下重量份配比的原料药制成：独活10-20份、威灵仙10-20份、制草乌3-9份、透骨草25-35份、海风藤10-20份、桂枝10-20份、鸡血藤10-20份、徐长卿10-20份、伸筋草10-20份、红花5-15份、五加皮10-20份。

作为本发明的一个优选例，所述中药组合物由以下重量份配比的原料药制成：独活12-18份、威灵仙12-18份、制草乌5-7份、透骨草28-32份、海风藤12-18份、桂枝12-18份、鸡血藤12-18份、徐长卿12-18份、伸筋草12-18份、红花8-12份、五加皮12-18份。

更优选地，所述中药组合物由以下重量份配比的原料药制成：独活15份、威灵仙15份、制草乌6份、透骨草30份、海风藤15份、桂枝15份、鸡血藤15份、徐长卿15份、伸筋草15份、红花10份、五加皮15份。

作为本发明的另一优选例，所述中药组合物的剂型为外用剂型。

更优选地，所述外用剂型为外用散剂、洗剂、贴剂、软膏剂、凝胶剂、糊剂、涂膜剂、巴布剂或外用气雾剂。

为解决上述第二个技术问题，本发明采取的技术方案是：

如上任一所述的中药组合物在制备外用治疗膝关节退行性病变的药物中的应用。

作为本发明的一个优选例，所述治疗膝关节退行性病变指改善膝关节退行性病变引起的膝关节疼痛、活动受限、肿胀或步态。

为解决上述第三个技术问题，本发明采取的技术方案是：

一种治疗膝关节退行性病变的护膝包，所述护膝包内含有如上任一所述的中药组合物。

本发明优点在于：

1、本发明的中药组合物，独活、威灵仙、徐长卿、桂枝温通除痹为君药，其中独活主入肾经，性善下行，尤以腰膝腿足，关节疼痛，属下部寒湿者为宜；配徐长卿、威灵仙，能祛风湿、通络止痛；而桂枝辛甘温通，具有温通人体一身之阳气，四药相伍，不仅能祛下肢风寒湿邪治本，又能温通经络止痛除标；五加皮、制草乌、红花、鸡血藤加强祛寒湿活血止痛之功为臣、伸筋草、透骨草舒筋止痛为佐，海风藤通络为使。动物实验表明治疗膝关节退行性病变药效显著，可明显改善动物模型的膝关节疼痛程度、关节活动程度、肿胀程度及步态。

2、本发明中药组合物药味组成较少，更便于制备，降低了成本。

3、本发明中药组合物为外用方式给药，不经过肝脏首过效应，提高了药物的生物利用度，也减少了肝脏毒性。

具体实施方式

下面对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1本发明中药组合物外用散剂的制备(一)

按重量份配比称取各原料药：独活15份、威灵仙15份、制草乌6份、透骨草30份、海风藤15份、桂枝15份、鸡血藤15份、徐长卿15份、伸筋草15份、红花10份、五加皮15份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例2本发明中药组合物外用散剂的制备(二)

按重量份配比称取各原料药：独活20份、威灵仙10份、制草乌9份、透骨草25份、海风藤20份、桂枝10份、鸡血藤20份、徐长卿10份、伸筋草20份、红花5份、五加皮20份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例3本发明中药组合物外用散剂的制备(三)

按重量份配比称取各原料药：独活20份、威灵仙20份、制草乌9份、透骨草25份、海风藤10份、桂枝10份、鸡血藤20份、徐长卿20份、伸筋草20份、红花5份、五加皮10份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例4本发明中药组合物外用散剂的制备(四)

按重量份配比称取各原料药：独活20份、威灵仙20份、制草乌9份、透骨草25份、海风藤10份、桂枝10份、鸡血藤10份、徐长卿20份、伸筋草10份、红花15份、五加皮10份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例5本发明中药组合物外用散剂的制备(五)

按重量份配比称取各原料药：独活10份、威灵仙20份、制草乌3份、透骨草35份、海风藤10份、桂枝20份、鸡血藤10份、徐长卿20份、伸筋草10份、红花15份、五加皮10份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例6本发明中药组合物外用散剂的制备(六)

按重量份配比称取各原料药：独活18份、威灵仙12份、制草乌7份、透骨草28份、海风藤18份、桂枝12份、鸡血藤18份、徐长卿12份、伸筋草18份、红花8份、五加皮18份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例7本发明中药组合物外用散剂的制备(七)

按重量份配比称取各原料药：独活12份、威灵仙12份、制草乌5份、透骨草28份、海风藤18份、桂枝18份、鸡血藤18份、徐长卿18份、伸筋草12份、红花8份、五加皮12份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例8本发明中药组合物外用散剂的制备(八)

按重量份配比称取各原料药：独活12份、威灵仙18份、制草乌5份、透骨草32份、海风藤12份、桂枝18份、鸡血藤12份、徐长卿18份、伸筋草12份、红花12份、五加皮12份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例9本发明中药组合物外用散剂的制备(九)

按重量份配比称取各原料药：独活18份、威灵仙18份、制草乌7份、透骨草28份、海风藤12份、桂枝12份、鸡血藤18份、徐长卿12份、伸筋草18份、红花8份、五加皮12份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例10本发明中药组合物外用散剂的制备(十)

按重量份配比称取各原料药：独活12份、威灵仙18份、制草乌5份、透骨草32份、海风藤12份、桂枝18份、鸡血藤10份、徐长卿20份、伸筋草10份、红花15份、五加皮10份，粉碎后混合均匀，得到外用散剂。

实施例11本发明中药组合物贴剂的制备

(1)取实施例1-10任一所述的中药组合物，加入8-10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小时，趁热过滤，合并两次煎煮的药液备用；

(2)上述药液经真空减压浓缩，除去水溶液，所得浸膏真空干燥；

(3)称取上述浸膏粉2g，加入药用甘油2-6ml，调成糊状，加入0.3-2克冰片后调匀，均匀地摊铺在固定大小的方形医用胶布上，四周边缘留出一定大小来固定胶布。

实施例12本发明中药组合物洗剂的制备

取实施例1-10任一所述的中药组合物，加入8-10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小时，趁热过滤，合并两次煎煮的药液，即得。

实施例13本发明中药组合物软膏剂的制备

(1)取实施例1-10任一所述的中药组合物，加入8-10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小时，趁热过滤，合并两次煎煮的药液备用；

(2)上述药液经真空减压浓缩，得到浓缩液，加入蜂蜡和黄凡士林，温火煎熬搅拌，冷却成膏状物。

实施例14本发明中药组合物凝胶剂的制备

(1)取实施例1-10任一所述的中药组合物，加入8-10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小时，趁热过滤，合并两次煎煮的药液备用；

(2)上述药液经真空减压浓缩，得到浓缩液；将卡波姆加入甘油中研磨使湿润，再加入少量蒸馏水研磨后，移到量杯中，另取三乙醇胺、羟苯乙脂、蒸馏水适量使溶解，搅拌成凝胶状，再加适量蒸馏水搅匀；加入上述浓缩液，研匀即得。

实施例15本发明中药组合物巴布剂的制备

(1)取实施例1-10任一所述的中药组合物，加入8-10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小时，趁热过滤，合并两次煎煮的药液备用；

(2)上述药液经真空减压浓缩，得到浓缩液，加入山梨醇、甘油等常规巴布剂基质，搅匀，涂布于支持层，加入保护层即得。

实施例16本发明中药组合物护膝包的制备

取实施例1-10任一所述的中药组合物适量，缝制于可绕膝固定的布袋中。

实施例17本发明中药组合物治疗膝关节退行性病变的动物实验

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物

6月龄健康日本雄性大耳白兔50只，体重2.0-2.5kg，购于成都达硕实验动物有限公司。实验前适应性饲养一周。

1.1.2治疗药物

本发明中药组合物制成的护膝包：按照实施例1的配比制成中药组合物散剂，然后装入自制的护膝包。护膝包由棉布制成，正面为一边长4cm的正方形药囊，药囊两边各缝制一根松紧系带，用于包绕动物膝部并固定。

对照中药组合物制成的护膝包：同上，但中药组合物的原料药组成不同，具体为：独活15份、威灵仙15份、制草乌6份、透骨草30份、海风藤15份、桂枝15份、鸡血藤15份、徐长卿15份、伸筋草15份、川芎10份、桑寄生15份。

玻璃酸钠：购自上海景峰制药有限公司，国药准字H20000159。

1.1.3主要试剂

水合氯醛，多种浓度乙醇，二甲苯，石蜡，蒸馏水，苏木精染料，伊红染料，TNF-α放免试剂盒和MMP-3放免试剂盒(北京科美东雅生物技术有限公司)。

1.1.4主要实验仪器

离心机，电子天平，低温冰箱，Leica石蜡包埋机，Leica石蜡切片机，Olympus显微镜。

1.2实验方法

1.2.1造模

采用左后肢伸直位固定法造模。动物造模前16小时禁食，耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠溶液30mg/kg。麻醉后将兔左后肢由髋关节至脚趾剃刀去毛，伸展膝关节至150-180°，踝关节背屈至60-90°，纱布缠绕固定，避免直接接触石膏磨损表皮。将石膏绷带浸入80℃热水中，软化后从腹股沟至脚趾缠绕兔左后肢，脚趾露出，以观察血供情况，最后用绷带固定，缠绕纱布防止撕咬。造模期间每日两次观察制动情况及其脚趾血流情况，6周后解除束缚。

1.2.2分组与治疗

将购买的日本雄性大耳白兔随机分为正常组和造模组。造模组造模成功后随机分为模型组、本发明护膝包治疗组、对照护膝包治疗组和玻璃酸钠治疗组，每组10只。本发明护膝包治疗组和对照护膝包治疗组使用相应护膝包固定于兔膝关节，药囊位于膝关节正前方，每日使用12小时。玻璃酸钠治疗组给予玻璃酸钠关节腔注射，每周一次，每次0.3ml。正常组和模型组使用棉花填充的护膝包模拟治疗。连续治疗4周。

1.2.3观察指标

1.2.3.1 Lequesne MG评分评估

治疗前即造模结束后以及治疗后均根据改良版Lequesne MG量表评估各组兔膝关节和行为学改变情况。由同一名不知情的非本实验人员进行评分并记录总分，评分标准见表1。

表1 Lequesne MG量表

1.2.3.2膝关节软骨HE染色观察

治疗结束后，所有兔采用空气栓塞法处死，使用眼科剪与尖刀片切取膝关节面正中软骨约50mg软骨标本，用0.9％生理盐水洗净后，直接置于体积分数4％的中性甲醛中固定72h，脱水，石蜡包埋，切片，HE染色后观察膝关节软骨病理形态。

1.2.3.3软骨组织TNF-α和MMP-3含量测定

使用眼科剪与尖刀片切取膝关节面正中软骨约50mg软骨标本，用0.9％生理盐水洗净后，剪碎，加入0.9％生理盐水匀浆，匀浆液冷冻离心后取上清，按照试剂盒说明检测软骨组织TNF-α和MMP-3含量

1.2.3.4统计学方法

数据采用软件SPSS23.0进行处理，计量结果用均数±标准差表示。采用单因素ANOVA分析数据，组间两两差异采用LSD检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

3实验结果

3.1各组Lequesne MG评分

模型组和各治疗组治疗前后兔局部疼痛刺激反应评分、步态评分、关节活动范围评分、关节肿胀程度评分均有所下降(表2-5)。治疗前各组的Lequesne MG评分均显著高于正常组(P<0.05)，表明造模成功，兔的膝关节和行为学出现明显的OA特征。各组在治疗后观察时的Lequesne MG评分相比于治疗前观察时的Lequesne MG评分均显著下降(P<0.05)，但各治疗组的Lequesne MG评分均显著小于模型组(P<0.05)，其中本发明护膝包治疗组兔的Lequesne MG评分最低，表明对OA模型膝关节的改善作用最为显著(表6)。

表2各组治疗前后局部疼痛刺激反应评分

表3各组治疗前后步态评分

表4各组治疗前后关节活动范围评分

表5各组治疗前后关节肿胀程度评分

表6各组治疗前后Lequesne MG评分比较

与正常组治疗前比较，*P<0.05；与本组治疗前比较，#P<0.05；与模型组治疗后比较，△P<0.05。

3.2各组兔膝关节软骨HE染色

对各组兔膝关节软骨进行HE染色观察，可见正常组兔的膝关节软骨细胞分布均匀，形态为梭形，排列正常。模型组兔的膝关节软骨细胞分布不均，出现大量细胞团状聚集，排列杂乱无章，有明显的炎性浸润。各治疗组的软骨细胞分布较为均匀，细胞团状聚集较少，排列较为规整，炎症细胞也明显少于模型组。

3.3各组兔膝关节软骨中TNF-α和MMP-3含量

与正常组比较，模型组兔膝关节软骨中TNF-α和MMP-3含量均明显升高(P<0.05)，表明出现炎症，促进软骨基质破坏的蛋白增加。而相比于模型组，各治疗组兔膝关节软骨中TNF-α和MMP-3含量均有显著下降(P<0.05)，其中以本发明护膝包治疗组兔膝关节软骨中TNF-α和MMP-3含量最低，表明本发明护膝包可以显著减轻OA引起的骨关节软骨炎症和减少造成软骨退行性改变的MMP-3的表达(表7)。

表7各组兔膝关节软骨中TNF-α和MMP-3含量比较

与正常组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。