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一种从卵泡液中提取cfDNA的方法

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本发明公开了一种从卵泡液中提取cfDNA的方法，通过对卵泡液样本两步离心去除多余细胞碎片；利用裂解液对卵泡液进行裂解，加入的蛋白酶K消化多余的蛋白，同时加入的Carrier RNA使DNA更易析出沉降；利用羧基磁珠对DNA的吸附作用；在高盐低pH的条件下，将卵泡液中的cfDNA吸附到磁珠上，经过盐洗涤和醇洗涤后，去除100bp以下的片段，洗脱后再次加入0.5倍体积的羧基磁珠，吸附并去除大于300bp的长片段，获得合适长度范围的cfDNA。同时对所获的cfDNA进行末端修复，产生平末端连接，并在3’末端添加碱基A，并在cfDNA两端添加接头并扩增纯化等，完成高通量文库的构建，最终完成上机测序。

著录项

公开/公告号CN110144345B

专利类型发明专利
公开/公告日2022-07-15

原文格式PDF
申请/专利权人上海交通大学;
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申请/专利号CN201910390311.6
发明设计人康亚妮;秦玉兰;毛湛睿;赵晖;
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申请日2019-05-10
分类号C12N15/10;
代理机构上海旭诚知识产权代理有限公司;
代理人郑立
地址 200240 上海市闵行区东川路800号
入库时间 2022-09-06 00:34:49

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