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布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法

摘要

一种生物技术领域的酶的布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法,具体步骤如下:分别设计引物,扩增布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶的α亚基和β亚基基因;将α亚基和β亚基基因分别克隆到原核表达载体pET21a(+)中,构建pET21a(+)-PheRSα及pET21a(+)-PheRSβ表达载体;将α亚基的操纵子亚克隆到pET21a(+)-PheRSβ中,形成重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ;将重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ转化大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中,IPTG诱导表达;收集裂解后的菌液上清,纯化蛋白,得布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶。本发明构建布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶(PheRS)的重组质粒,表达纯化出布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶蛋白,为抗寄生虫药物的筛选奠定了基础。

著录项

  • 公开/公告号CN101633915B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2011-06-08

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海交通大学;

    申请/专利号CN200910056686.5

  • 发明设计人 姚璎;杲光伟;李大伟;

    申请日2009-08-20

  • 分类号C12N9/00(20060101);C12N15/70(20060101);C12R1/19(20060101);

  • 代理机构31201 上海交达专利事务所;

  • 代理人王锡麟;王桂忠

  • 地址 200240 上海市闵行区东川路800号

  • 入库时间 2022-08-23 09:06:48

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2013-07-17

    专利权的转移 IPC(主分类):C12N 9/00 变更前: 变更后: 登记生效日:20130624 申请日:20090820

    专利申请权、专利权的转移

  • 2011-06-08

    授权

    授权

  • 2010-03-24

    实质审查的生效

    实质审查的生效

  • 2010-01-27

    公开

    公开

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