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从表达腺病毒E1A蛋白的细胞中获得唾液酸化增加的重组蛋白质的方法及由此获得的蛋白质

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本发明提供了包含一或多种同种型红细胞生成素(EPO)的组合物，所述红细胞生成素包含与其连接的聚糖，特征在于所述聚糖包含LewisX结构及每个EPO分子平均至少6个唾液酸部分。本发明进一步提供了获得包含一或多种同种型红细胞生成素(EPO)的组合物的方法，所述红细胞生成素包含与其连接的聚糖，其中所述聚糖包含平均每个EPO分子至少6个唾液酸及0—2个Lewis x结构，所述方法包括：a)提供含有可表达形式的编码腺病毒ElA蛋白的核酸序列及进一步含有可表达形式的编码EPO的核酸的真核细胞，其中所述细胞进一步含有在异源启动子控制下的编码唾液酸转移酶、优选α-2，6-唾液酸转移酶或α-2，3-唾液酸转移酶的核酸序列；b)在无血清培养基中培养所述细胞，使得EPO在所述细胞中表达；c)从所述细胞和/或培养基中收获表达的EPO；及d)纯化并分级分离EPO以获得每个EPO分子N联聚糖的平均唾液酸含量增加的级分，获得包含一或多种同种型EPO的组合物，所述EPO包含与其连接的聚糖，其中所述聚糖包含每个EPO分子平均至少6个唾液酸及0—2个Lewis x结构。

著录项

公开/公告号CN101090973B

专利类型发明专利
公开/公告日2012-03-28

原文格式PDF
申请/专利权人克鲁塞尔荷兰公司;
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申请/专利号CN200580045170.0
发明设计人 D·J·E·奥普斯泰尔滕;
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申请日2005-12-28
分类号
代理机构永新专利商标代理有限公司;
代理人林晓红
地址荷兰莱顿
入库时间 2022-08-23 09:09:18

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2012-03-28

授权

授权
2008-02-13

实质审查的生效

实质审查的生效
2007-12-19

公开

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