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首页> 中文会议>2010年全国生物医药色谱学术交流会 >细胞中多巴胺及儿茶酚胺异喹啉类物质HPLC-MS/MS检测

细胞中多巴胺及儿茶酚胺异喹啉类物质HPLC-MS/MS检测

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本文建立了高效液相色谱-质谱法测定细胞样品中多巴胺(Dopamine，DA)、1-甲基-6，7-二羟基-1，2，3，4.四氢异喹啉(Salsolinol，Sal)和N-甲基-6,7.二羟基-1，2,3,4-四氢异喹啉(N-methyl-salsolinol，NMsal)含量的检测方法。细胞样品经超声破碎，离心取上清，经1M高氯酸溶液除蛋白，再次离心取上清后，经高效液相色谱-质谱测定，选择母子-离子对多离子反应监测(MRM)，内标法进行定量。采用Discovery HS F5柱(150mm×2.1mm，3μm);流动相为5mM甲酸铵缓冲溶液(pH=3.0)-甲醇(80：20，V／V)。DA、Sal和NMSal在0.5～100μg／L范围内线性关系良好(r>0.9995)，检出限分别为0.20，0.34，0.33μg／L，日内和日间精密度(以相对标准偏差表示，RSD)均低于8％，回收率分别为91.4％～109.6％，87.4％～109.7％，88.0％～102.7％。用该方法检测经过氧化氢诱导的神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y，发现DA和Sal的含量与对照组相比都有显著增加。该方法选择性好，灵敏度高，适用于测定细胞样品中DA、Sal和NMSal的含量的相关研究。

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