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小鼠肠道菌群失衡模型建立及菌群失衡对肠道Toll样受体的影响

摘要

目的:1.以肠道优势菌群变化情况为依据,利用抗生素干扰建立不同程度的菌群失衡小鼠模型。2.研究肠道菌群失衡对小鼠肠粘膜上皮TOll样受体信号转导通路的影响,探明微生态菌群失衡与肠道免疫屏障的分子应答及其在感染性疾病发生、发展中的作用和机理,为感染性疾病的防治提供新思路和新策略。rn 方法:1.选用抗生素头孢曲松钠,以终浓度5g/kg/d的剂量,行小鼠灌胃,连续8天,取盲肠内容物进行肠道菌群分析,建立轻度菌群失衡模型;以头孢曲松钠终浓度8g/kg/d的剂量,行小鼠灌胃,连续8天,通过菌群分析建立重度菌群失衡模型。2.利用EDTA振荡法提取正常组与轻度、重度菌群失衡小鼠肠粘膜上皮细胞;RT-PCR方法检测TLR9、TLR4、TLR2的变化;利用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测NF-KBp65的变化。rn 结果:1.通过培养基改良和培养鉴定方法,建立了肠道双歧杆菌属、乳酸杆菌属、类杆菌属、优杆菌属、肠球菌属、链球菌属、梭杆菌属、韦荣球菌属、消化球菌属、巨球菌属、肠杆菌属、葡萄球菌属、酵母菌属、霉菌属十四种肠道优势菌群稳定的培养计数分析方法。2.通过抗生素头孢曲松钠不同浓度的诱导,建立了稳定的轻度菌群失衡模型和重度菌群失衡小鼠模型。3.菌群失衡小鼠较正常组小鼠TLR9呈下降趋势,TLR4和TLR2呈升高趋势,重度菌群失衡较轻度菌群失衡变化明显。4.菌群失衡小鼠较正常组小鼠NF-KBp65呈升高趋势,且重度失衡较轻度失衡升高明显。rn 结论:利用抗生素头孢曲松钠能建立稳定的轻度菌群失衡模型和重度菌群失衡小鼠模型;肠上皮Toll样受体变化受菌群变化的影响,菌群失衡促使TLR9表达量下降;TLR2和TLR4表达量呈一过性升高,NF-KBp65表达量升高。

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