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脾虚对大鼠肠黏膜结构与免疫相关基因表达的影响

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[研究目的] 研究脾虚对大鼠小肠结构及基因表达谱的影响，完成相关生物信息学分析。[方法]采用SD大鼠，复制利血平脾虚模型，设正常组与脾虚组，造模7天后扑杀，采集十二指肠、空肠、回肠，其中一部分固定、石蜡切片、H.E.染色，观察肠黏膜形态变化，并检测肠绒毛长度、隐窝深度、上皮淋巴细胞数; 另一部分冻存，提取mRNA，采用大鼠全基因组芯片研究脾虚大鼠空肠基因表达变化，并用荧光定量PCR法验证免疫反应相关差异基因表达，通过GeneSpdng GX 10.0分析软件完成分类(Gene Ontology)和基因网络图(net)。[结果]与对照组比较，脾虚组大鼠的体重显著下降; 空肠黏膜结构严重损伤，十二指肠，空肠与回肠绒毛长度、隐窝深度，均出现不同程度的降低; 脾虚空肠基因表达谱发生改变，筛选出脾虚组免疫反应相关差异基因12个，并进行验证，验证结果表明芯片结果数据可靠。其中天然免疫相关基因5个，并制作基因网络图net分析预测，脾虚组以TLR2与TLR4为中心交化显著，TLR2可能通过刺激产生TNF，下调补体C3从而下调免疫反应，而Mx2目前未发现与其他差异基因存在联系。[结论] 脾虚导致大鼠空肠黏膜结构损伤，以致其黏膜免疫功能受损，降低了免疫相关基因的表达量，特别是天然免疫相关基因，以TLR2，4为主。

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