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抗人CD4人鼠嵌合抗体的基因构建及其在真核细胞中的瞬时表达

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目的：构建抗CD4真核表达载体并在真核细胞中进行瞬时表达。rn 方法：分别扩增人IgG1κ抗体恒定区基因和抗CD4鼠单抗可变区基因并采用SOE(Gene splicing byovertap extension)法进行拼接，然后分别与真核表达载体pOptiVECTM-TOPO和pOptiVECTM-TOPO进行连接。将构建的抗cD4真核表达载体pOptiVEC-H和pcDNA3.3-L以及pOptiVEC-L和pcDNA3.3-H分别瞬时共转染真核细胞CHO-S，以RT-PCR鉴定嵌合抗体基因转录，以间接ELISA和直接免疫荧光法(Direct immunofluorescenceassay)鉴定嵌合抗体基因的表达。rn 结果：成功构建了抗CD4真核表达载体pOptiVEC-H和pcDNA3.3-L以及pOptiVEC-L和peDNA3.3-H，并在真核细胞CHO-S中实现了瞬时表达。rn 结论：为抗CD4嵌合抗体基因实现稳定表达打下一定基础。

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来源
《第十次全国生物制品学术会议》|2009年|p.358-363|共6页
会议地点兰州
作者
胡迪超; 张爱华; 闭兰; 张雪; 潘勇兵; 孙可芳; 杨晓明;
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作者单位

中国微生物学会;

中华预防医学会;

中国医药生物技术协会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;基因的表达;
关键词
嵌合抗体; 瞬时表达; 真核细胞; 基因转录; 直接免疫荧光法;

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