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重组脑膜炎球菌P64K蛋白的表达、纯化及载体作用

摘要

目的:表达并纯化重组脑膜炎球菌P64K蛋白,并考察其载体作用。rn 方法:利用基因工程技术在大肠杆菌中表达P64K,用硫酸铵沉淀和两步层析纯化P64K;以重组P64K为载体蛋白,以ADH为连接剂,在EDAC的作用下,与活化的A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)结合,制备GAMP-P64K结合物,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法测定血清中抗P64K特异性抗体和抗A群脑膜炎球菌多糖特异性IgG抗体,并分析其免疫原性。rn 结果:重组脑膜炎球菌P64K蛋白在大肠杆菌中主要以可溶性形式表达,表达量达35%左右;动物实验证明重组P64K蛋白具有较强的免疫原性,有载体蛋白的作用。rn 结论:成功表达了重组P64K蛋白,重组P64K蛋白作为载体制备的GAMP-P64K结合物具有良好的免疫原性,为以重组P64K蛋白为蛋白载体制备其他结合疫苗奠定了实验基础。

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