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人乳头瘤病毒2(HPV2)E2蛋白不同功能区域的突变点能够影响其转录抑制作用

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人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是引起皮肤和肛门、生殖器良性和恶性疣状增生性病变的主要原因。其中HPV-2与皮肤寻常疣的发生密切相关。我们前期的研究发现，一株发现于巨大寻常疣患的HPV2变异株的E2蛋白存在多点突变，而且这株变异的E2蛋白能够引起病毒启动子的活性的改变，为了进一步研究E2蛋白这些突变点与病毒启动子之间的关系，我们根据HPV2突变株的这些突变点设计了不同的引物，分别采用延伸法对标准序列进行突变，实验中构建的这些突变点主要分布在E2蛋白的N端、c端以及两者之间的铰链区。PCR进行扩增并纯化，与T载体连接。经过测序证实后，构建了E2不同的突变体的真核表达质粒，并用脂质体法与带有LCR的CAT报道基因载体进行共转染。以同时转染pCMV-β-gal质粒作为内对照来消除由于不同孔、不同批次之间转染效率的不同对实验结果造成的影响。通过检测转染细胞上清中CAT的表达量，从而获得不同E2区域点突变对病毒启动子活性抑制作用的影响研究。结果说明，根据HPV2变异株上的点突变设计的这些突变点分别位于E2蛋白的C端DNA区、N端的调控区以及两者之间的铰链区，均能够影响E2蛋白对启动子活性的抑制作用。对于这些突变位点与其启动子活性之间存在的关系的研究，为进一步揭示与这例罕见巨大寻常疣临床表型之间存在着重要的联系提供了线索。

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来源
《第二届全国人畜共患病学术研讨会》|2008年|138-141|共4页
会议地点江苏泰州
作者

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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类人体病毒学（致病病毒）;
关键词
HPV2; 启动子; E2; 突变;

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