人乳头瘤病毒(HPV)衣壳蛋白L1的体外可控杂合自组装

摘要

以降低预防性人乳头瘤病毒(HPV)疫苗成本、提高其稳定性和广谱性为出发点,以深入揭示HPV衣壳蛋白自组装机理和关键因素为目的,主要开展了由单体到五聚体、再到VLPs的多级、杂合体外可控自组装.通过基因重组互换关键肽链段,以高危型HPV16L1、18L1为例构建了两个重组L1蛋白基因;经表达、纯化后FPLC确认它们都能形成很好的五聚体——16L1Bi-P和18L1Bi-P,表明上述序列互换并不影响各自五聚体的形成.经体外优化组装后,单独的16L1Bi-P、18L1Bi-P和两者的混合物均形成了粒径在~50nm的VLPs.对组装过程的稳态光散射(SLS)监测显示三体系经历了不同的组装途径,因此混合组装液中存在两者杂合VLPs的可能;进一步的蔗糖梯度离心分离和免疫共沉淀(Co-Ia)确认了上述猜测.

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