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首页> 中文会议>2006年中国国际肝胆外科论坛 >MAT2A siRNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长的影响

MAT2A siRNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长的影响

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目的：探讨MAT2A小干扰RNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长和细胞凋亡的影响。rn 方法：采用脂质体转染法将MAT2A小干扰RNA质粒表达载体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞．建立持续转录小干扰RNA的细胞系，并将该细胞系皮下接种裸鼠，观察肿瘤生长情况;为进一步观察裸鼠体内抑瘤性，将皮下接种稳定表达小干扰RNA的Bel一7402细胞系的裸鼠分为三组：A、盐水对照组，B、空质粒对照组，C、siRNA治疗组;于接种后第12天，每组动物行纯化质粒DNA瘤内注射，观察肿瘤大小;治疗后两周，处死所有动物，取肿瘤，测量大小;部分石腊色埋切片、H&E染色，部分进行凋亡检测。rn 结果：得到稳定转染siRNA载体、并能持续表达siRNA的Bel一7402细胞系，将稳定建系的细胞传代，持续表达siRNA细胞系肿瘤细胞生长明显缓慢。皮下接种建系的Bel－7402细胞建立荷瘤鼠模型，可以观察到siRNA组肿瘤牛长缓慢，平均第13天才长出皮下可及、但肉眼看不到的肿瘤，而接种control siRNA组，平均第9天可长出肉眼可见的肿瘤;用裸鼠肿瘤模型观察siRNA的体内抑瘤效果，质粒DNA注射后，对照组瘤体10.93mm3，空质粒对照组为11.13mm3，而siRNA质粒转染组为4.26mm3(P<0,01);HE染色显示，对照组和空质粒组质粒DNA注射后，病灶充满肿瘤细胞;而siRNA组质粒DNA注射后，病灶内有大量炎性细胞浸润，坏死明显，仅见少量肿瘤细胞;且siRNA明显诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡，其凋亡指数为(28.79±2.13)%，较盐水对照组(9.54±1.89)%和空质粒治疗组(10.24±2.06)%明显升高(t=15.41，P<0.01)。rn 结论：靶向MAT2A基因的siRNA诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡，抑制肝癌细胞生长。

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