摘要:目的:检测NEK6在HepG2细胞中的定位,肝细胞肝癌组织与正常肝脏组织中的表达水平,分析其与临床病理学资料间的关系。方法:在HepG2细胞中转染pMCV-Nek6-Myc和pMCV-Nek6-Flag,应用间接免疫荧光法测定NEK6在HepG2细胞中的定位;应用RT-qPCR法检测47例肝细胞肝癌(HCC)组织与相应远癌旁组织(1 cm)中NEK6 mRNA的表达水平;应用Western blot法检测该47例肝细胞肝癌组织与相应正常肝组织中NEK6蛋白的表达水平。收集并统计该组患者的临床病理学资料,包括性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量(单个/多个)、血清AFP水平(≥400 ng/ml或400 ng/ml)、Edmondson分级、纤维包膜、微血管侵犯(microvascular invasion, MVI)等,分析NEK6 mRNA表达水平与各临床病理特点的关系。配对样本应用配对t检验,单因素分析用卡方检验,多因素分析用二元Logistic回归分析,以P 0.05认为结果有统计学意义。结果:免疫荧光实验显示,NEK6主要定位于HepG2细胞的细胞核中,在细胞质中也有少量存在;RT-qPCR结果显示,NEK6 mRNA在HCC中的表达量为(1.405 ±0.472),显著高于正常肝组织中的表达量(1.133 ±0.474),差异有统计学意义(t = 3.143, P = 0.0029);Western blot结果显示,NEK6蛋白在HCC中的表达量为(1.031 ±0.193),显著高于正常肝组织中的表达量(0.906 ±0.182),差异有统计学意义(t = 3.464, P = 0.0012)。结论:NEK6主要存在于HepG2细胞的细胞核中,在肝细胞肝癌中表达上调,微血管侵犯是Nek6表达水平的独立相关因素,可能作为肝癌预后不良的判断指标之一。