DHA高产裂殖壶菌EST文库的构建与分析

摘要

DHA(Docosahexaenoic acid,二十二碳六烯酸)是重要的ω-3高度不饱和脂肪酸之一,具有各种重要生理功能.本文构建了Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA文库,其原始文库库容为5.0×106 cfu;从5'端测序,共获得4005条高质量EST(Expressed sequence tag,表达序列标签),平均长度470 bp,ESTs经拼接获得1947条unigenes;利用Blast将Unigenes与NCBI蛋白数据库和核酸数据库进行比对,其中878条Unigenes(45.10%)与蛋白数据库和中已报道的蛋白具有同源性(E<10-5),168条Unigenes(8.51%)与核酸数据库中已报道的基因具有同源性(E<10-10);Schizochytrium cDNA文库中高度保守的基因(E<10-100)主要有:α/β-微管蛋白、肌动蛋白A、蛋白磷酸化酶Ⅰ、腺苷高半胱氨酸酶、高度不饱和脂肪酸合成酶、G蛋白β亚基、α-谷胱苷肽S-转移酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶;与真核模式生物基因的同源性比较表明,Schizochytrium与真核模式生物共有的高度保守基因主要是编码α-微管蛋白1、肌动蛋白A以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶的基因;根据基因命名词汇体系,对具有注释信息的基因进行了功能分类,结果表明结合与催化活性占细胞分子功能的比重较大(分别为36.00%与41.55%);利用pfam将Unigenes与功能确定的蛋白质家族进行匹配搜索,当E<10-2时,605个unigenes(31.07%)与蛋白家族388个结构域相匹配.Schizochytrium cDNA文库的构建与分析,为研究Schizochytrium脂肪酸生物合成PKS途径奠定基础.

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