转TNF-α基因工程鱼腥藻IB-02中重组质粒稳定性的研究

摘要

为利用已经构建的转TNF-α基因的工程鱼腥藻IB-02制备口服剂,必须了解工程藻中重组质粒的遗传稳定性.应用匀浆法,将每一代次无选择压力下培养的含pMD-489-TNF重组质粒的丝状体转基因藻IB-02处理成单细胞后,采用无选择压力下平板稀释涂布培养,选择压力下挑单藻落于试管中振荡培养,测定了pMD-489-TNF重组质粒在转基因鱼腥藻IB-02中的分配稳定性,并对每代次的质粒进行PCR扩增,验证了pMD-489-TNF重组质粒在转基因藻IB-02中的结构稳定性.实验结果表明,pMD-489-TNF重组质粒在转基因鱼腥藻IB-02中具有较高的分配稳定性和结构稳定性,是制备重组TNF-α口服剂的理想工程菌.

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