毛蕊异黄酮对内皮细胞骨架的影响

摘要

目的:黄芪是临床常用的补气类药物,具有调节机体免疫力、改善内皮功能等多种药理作用,毛蕊异黄酮是其主要有效成分之一.内皮功能损害与心血管疾病、慢性肾脏病等疾病密切相关,而细胞骨架是内皮功能的基础,其损害往往先于内皮功能的异常.本实验观察了黄芪的主要有效成分毛蕊异黄酮对脂多糖(LPS)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的干预作用,探讨中药单体对内皮细胞细胞骨架及通透性的影响,为其对内皮细胞功能的保护作用提供实验支持,同时为中医补气药治疗内皮损伤相关性疾病提供理论依据.rn 方法:HUVECs分为LPS诱导组,Y27632(ROCK特异性抑制剂)和缬沙坦(西AngII受体1拮抗剂,Rho/ROCK信号通路的间接抑制剂)对照组,毛蕊异黄酮干预组。观察毛蕊异黄酮对LPS诱导内皮损伤后HUVECs变化:并观察细胞存活率、凋亡率,细胞迁移黏附能力及细胞培养上清中的cNOS、iNOS和NO浓度,同时观察细胞骨架和黏着斑蛋白结构和分布。rn 结果:LPS成功诱导构建了HUVECs细胞骨架损伤模型。HUVECs细胞增殖减弱、凋亡增加,细胞骨架肌动蛋白皱缩、黏着斑蛋白聚集,LPS活化内皮、诱导肌球蛋白收缩,导致细胞间隙开放、内皮通透性增加、促进白细胞趋化,细胞迁移能力和黏附能力下降。LPS作用24h后,cNOS减低,tNOS、iNOS、NO升高,呈现内皮损伤和炎症状态。rn 结论:LPS诱导了HUVECs细胞骨架损伤,毛蕊异黄酮对LPS诱导的HUVECs细胞骨架损伤具有显著的保护作用,通过稳定细胞骨架结构、调节凋亡率、调节细胞合成和利用NO的能力、改变细胞迁移和黏附能力,而调节血管内皮通透性、改善内皮屏障功能。毛蕊异黄酮可以促进HUVECs凋亡,加快内皮新陈代谢、减少内皮增生,可减缓应力性血管内皮损伤,改善血管内膜增生和狭窄,为中医补气类药物的典型代表黄芪的临床应用提供了内皮保护方面的理论基础。

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