鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白中和性B细胞抗原表位鉴定

摘要

本文在应用生物信息学技术分析鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2蛋白结构的基础上,设计并用Fmoc固相多肽合成方法合成AG30和LG30两条IBDVVP2多肽及其overlapping片断,经HPLC检测和纯化后与载体蛋白偶联,应用Dot-ELISA和Peptide-ELISA检测多肽与单克隆抗体的反应性.Dot-ELISA结果显示AG30和LG30分别和单抗HNF31和HNF33具有反应性,经overlapping多肽筛选,中和性单抗HNF31和HNF33分别识别VP2蛋白的线性氨基酸序列为203-210和325-334.将两个表位多肽等量混合后与载体蛋白连接制备免疫原并免疫Balb/c小鼠,免疫抗体能够特异性识别表位多肽,并对血清Ⅰ型IBDV超强毒株和疫苗株病毒具有中和活性.序列分析和抗原捕获ELISA证明该两株单抗能够识别IBDV弱毒株、强毒株和超强毒株,说明该抗原表位在免疫学上具有保守性.该项研究结果对鸡IBDV与免疫系统相互作用的免疫识别研究具有重要意义.

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