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改良酶法乙醇测定试剂盒的研制

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目的:乙醇是法医和毒理实验室中最常见的检测项目.目前,生物样品中乙醇定量测定的参考方法为气相色谱法,但该法仪器昂贵,手续复杂不便推广,而酶法分析特异性强,可在分光光度计上进行测定,速度快,与气相色谱法相关性好,因此应用前景较广,但由于乙醇脱氢酶极不稳定,因此目前该试剂多制成干粉试剂,复溶后也须尽快使用,无法满足实际检测需求.本实验通过对现有酶法试剂的改良,探讨建立一种稳定的液体酶法测定血乙醇试剂盒.rn 方法:分光光度法考察乙醇脱氢酶在pH 6.0-9.0及0-50℃温度下的活性及稳定性;根据血乙醇反应前后吸光度的变化率，选择合适的反应促进剂及浓度;通过将试剂置于37℃水浴加速破坏，选择乙醇脱氢酶及氧化型辅酶I的保护剂;参考美国临床和实验室标准协会文件，考察试剂精密度、准确度、线性。rn 结果:乙醇脱氢酶的最适pH值为8.5-9.0, 0-37℃基本稳定;20g/L的盐酸肼能使反应灵敏度增加100%;加入5g/L谷胱甘肤、10g/L半胱氨酸后加速破坏试剂反应灵敏度下降小于10%，对乙醇高、低值混合标本重复测定20次，结果显示标本CV值分别为1.7%和2.6，线性范围为0-2.0g/L，与长春汇力公司的干粉试剂比较Y=1.0016X-0.0058，R2=0.9994。rn 结论:改良液体试剂方法简便，结果精确、线性范围宽，试剂稳定，适于实验室标本检测。

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来源
《浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛》|2014年|61|共1页
会议地点杭州
作者
沃燕波;
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作者单位

浙江省毒理学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类毒物的生理及化学作用;
关键词
毒理试验; 乙醇; 试剂盒; 液体酶法;

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