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重组牛肠激酶在大肠杆菌中的表达及制备

摘要

目的:克隆重组肠激酶轻链(EKL)基因并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出具有生物活性的EKL蛋白. 方法和结果:通过PCR获得二硫键异构酶(DsbA)基因和EKL基因的融合片断,此片断经回收和纯化后插入pET-3c表达质粒载体并获得高效表达DsbA-EKL的菌株,表达含EKL融合蛋白(含有6×His)经Ni柱鳌合和Q柱纯化后,显示出高效的EK酶切活性. 结论:用DsbA基因与EKL融合可溶性表达的重组蛋白中具有EK的高效酶切活性,为进一步研究EK活性和在生物制品中奠定基础.

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