旋毛虫新生幼虫WN1抗原基因的克隆及表达

摘要

应用旋毛虫人工感染猪血清对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,对阳性克隆WN1序列进行生物信息学分析,结果表明,WN1 cDNA全长为474bp,含有一个354 bp的完整的开放阅读框架(ORF),编码的多肽由117个氨基酸残基组成,其分子量理论推导值为13.2kDa,等电点为4.25,K-末端的信号肽表明其可能为分泌性蛋白,GenBank数据库检索表明,此序列为一新基因的全长cDNA.经PCR扩增WN1基因,将其克隆到原核表达载体pET28a,重组质粒经鉴定后,转化大肠杆菌BL21star(DE3)并诱导表达出分子量为15kDa的重组蛋白,与设计相符.

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