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一种基于免疫磁珠-多重PCR的沙门氏菌快速检测方法的建立

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沙门氏菌的检测普遍采用传统培养方法,该方法繁琐且费时费力.本研究拟结合沙门氏菌特异性免疫磁珠与多重PCR,建立一种快速、准确、简便、灵敏的检测方法,为畜牧生产提供良好的检测手段.通过透射扫描电镜TEM观察磁珠，结果表明磁珠呈规则圆形，大小均一且分散性良好，粒径约800nm;沙门氏菌抗体与磁珠的最佳反应介质为0.01mol/ml PBS缓冲液(PH7.4)、最佳反应时间为3h。结果表明，免疫磁珠富集沙门氏菌的最佳用量为150u1，最佳反应时间为30min;多重PCR可同时对沙门氏菌属、种进行鉴定，灵敏度为4.6×102CFU/ml，特异性良好;免疫磁珠-多重PCR的灵敏度为4.6×10CFU/ml，特异性良好，检测时间为8h;采用该方法对259份样品进行沙门氏菌检测，共检出沙门氏菌38株，其中鸡白痢沙门氏菌22株，肠炎沙门氏菌7株，与传统分离培养方法相比，阳性率一致，但检测时间大大缩短。研究结果表明，本研究建立的免疫磁珠-多重PCR方法用于检测沙门氏菌，具有灵敏度高、检测时间短和操作简便三个特点，为畜禽生产中沙门氏菌检测提供了良好手段。

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来源
《四川省畜牧兽医学会2014学术年会》|2014年|223|共1页
会议地点成都
作者
刘必慧; 王红宁; 雷昌伟; 张安云; 丁梦蝶; 张冬冬;
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作者单位

四川省畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 S852.612;
关键词
动物医学; 沙门氏菌; 免疫磁珠; 多重聚合酶链式反应; 检测技术;

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