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核盘菌菌株8-2中携带病毒的分子特性初步研究

摘要

本研究通过对采自四川省发病油菜上的菌核进行分离纯化,筛选获得一株菌落形态异常菌株8-2。相比于核盘菌正常菌株1980或Ep-1PNA367,菌株82在PDA上生长较慢,对油菜叶片呈现毒力衰退的特性,是一株典型的弱毒菌株。提取菌株8-2的dsRNA,发现该菌株中含有3条dsRNA片段(分别命名为dsRNAl、dsRNA2和dsRNA3),最大的片段超过lOkb,另外两条片段大小分别为6kb和1.8kb。回收纯化后进行随机克隆后,将获得的cDNA序列与NCBI数据库进行了比对分析,获得了dsRNA片段的部分遗传信息。其中dsRNAl是一种新型负单链RNA病毒的复制体,基于获得大部分cDNA序列分析,表明该负链病毒与与动物水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus)具有同源性,其基因组与典型的负链病毒具有相似性,因此将该病毒暂且命名为Sclerotinia sclerotiorum negatlve-strand RNA virus3(SsNSRV-3);另外两条dsRNA片段分别与Botrytis porri RNA virus1和Botryotinia fuckeli-ana partitivirus1具有同源性,是两个dsRNA病毒的基因组。通过原生质体再生试验和菌丝尖端脱毒研究发现,在原生质体再生菌株和菌丝顶端分离物中,相比dsRNA2和dsRNA3片段,病毒SsNSRV-3极易丢失。菌株8-2中所含病毒的全长序列、分类地位及其与菌株弱毒相关的特性正在研究中。

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