首页> 中文会议>中华中医药学会第十五次乳腺病中医、中西医结合学术研讨会 >红黄煎剂通过调节AKT/FoxO3a通路改善阿霉素造成的心肌细胞凋亡

红黄煎剂通过调节AKT/FoxO3a通路改善阿霉素造成的心肌细胞凋亡

摘要

目的:阿霉素是一种临床常用的化疗药物,其心脏毒性制约了它的临床使用,为了了解红黄煎剂在体外对阿霉素造成的心脏损伤降的作用,并探讨机制,做了如下体外实验. 方法:体外培养H9c2心肌细胞.用不同浓度红黄煎剂(HHD),阿霉素(DOX),红黄煎剂+阿霉素分别处理H9c2心肌细胞24h,MTT法检测细胞活力,TUNEL和DAPI双染法检测细胞凋亡率,western blot法检测细胞凋亡相关蛋白.然后Si-FoxO3a转染H9c2心肌细胞,免疫荧光及western blot法确定转染效果,western及MTT法检测红黄煎剂,阿霉素,红黄煎剂+可霉素对Si-FoxO3a转染的H9c2心肌细胞的作用. 结果:不同浓度(0-2mg·mL-1)的红黄煎剂作用与H9c2细胞,发现对细胞有一定的促进增值的作用(P<0.05),阿霉素作用与H9c2细胞,其IC50为3.03±0.11μM,加用红黄煎剂以后发现其抑制曲线下移,其IC50为7.07±0.48μM,其差异有统计学意义(P<0.01).TUNEL&DAPI双染法检测细胞凋亡,发现HHD+DOX将单用DOX组的凋亡率从43.23±5.22%下调到25.22±3.21%.其差异有统计学意义(P<0.01).红黄煎剂能显著下调阿霉素引起的Caspase-3的激活(p<0.05),同时能上调生存蛋白Bcl-2(p<0.05).同时红黄煎剂能够提高H9c2细胞中的Akt/FoxO3a磷酸化的水平.转染si-FoxO3a后细胞增值率下降(P<0.05),并且减弱了HHD促进细胞增值的作用(P<0.05)Western blot检测也证明了HHD在转染细胞系中的保护作用降低(P<0.05). 结论:红黄煎剂能降低阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其可能是通过调节AKT/FoxO3a产生的.

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