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单体复方四号对体外3D培养的椎间盘细胞外基质代谢的影响

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目的：'通痹12方'是施杞教授继承了传统的石氏伤科理论,在多年的临床实践中,创立的治疗颈腰椎退变性疾病的系列协定方,在龙华医院伤科门诊和多家社区医院推广应用.本研究前期利用数据挖掘技术对'通痹12方'的用药规律做研究,分析总结出其核心药对,并通过体内外实验筛选了核心药对中有效单体组分和最佳配伍组成：单体复方四号.本实验拟建立3-D gel体外的椎间盘模型,单体复方四号对体外3D培养的椎间盘细胞外基质代谢的影响,进一步阐明'施氏通痹12方'核心药对的作用机制. 方法：利用体视学解剖技术摘取6周龄C57小鼠的尾部椎间盘,培养于3D琼脂糖胶内,模拟生理状态的力学应力刺激和病理状态炎性因子诱导体外培养的椎间盘退变.形态学观察椎间盘结构改变,利用病理染色技术和Realtime-PCR分析椎间盘细胞外基质代谢情况,观察中药单体复方四号干预的效果. 结果：(1)藏红固绿染色结果发现正常对照组的纤维环有板层状排列的胶原纤维环及散在其间红色的纤维软骨细胞,其结构紧密,排列整齐,细胞分有均匀.软骨终板着色呈红色.髓核是椎间盘组织中着色最红的部分,结构疏松呈网状.IL-1β诱导模型组,纤维环排列不齐,结构疏松,软骨终板空隙增加,髓核着色力下降.复方4干预组,纤维环结构紧密,内部软骨细胞着色力强,髓核红色深染明显.(2)IL-1β诱导后椎间盘细胞胶原表达上调,蛋白多糖表达下调,基质降解酶MMP13和ADAMTS-5表达升高,炎症因子TNF-α表达升高达9倍以上.复方4干预后可增强IL-1β诱导产生的胶原表达升高作用,逆转IL-1β诱导后蛋白多糖Aggrecan的表达下降,不能明显下调MMP13的表达,对ADAMTS-5有轻度下调作用. 结论：(1)体外3D培养椎间盘在炎症因子IL-1β的诱导下,协同相关的炎症因子共同调节细胞外基质胶原增生,蛋白多糖成分含量下降,诱导基质代谢酶分泌,从而破坏细胞外基质的代谢平衡.(2)中药单体复方组合四号通过抑制炎性因子表达,调节细胞外基质胶原和蛋白多糖表达,抑制基质代谢酶的升高,从而稳定细胞外基质的代谢平衡.

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《第十三届世界华人地区长期照护研讨会暨上海市老年学学会老年学和老年医学青年学者分论坛》||191-197|共7页
会议地点北京
作者

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作者单位

世界华人地区长期照护联会;

中国人民大学;

上海市老年学学会;

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关键词
颈腰椎退变性疾病; 施氏通痹12方; 椎间盘细胞; 基质代谢;

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