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高产铁载体假单胞菌HYS铁载体相关基因的研究

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铁对于几乎所有生物体都是必需的微量元素,但是由于其在有氧条件下低的溶解度,使得环境中可利用的铁远远低于微生物的需求量.细菌通过分泌铁载体来解决这一问题.铁载体是由细菌、真菌分泌的一类低分子量铁的螯合物,可与环境中微量的游离铁离子结合,通过膜上特异性受体,将铁离子运输到胞内,满足生物体对铁的正常需求.假单胞菌HYS是由本实验室从东湖水域中筛选得到的一株高产铁载体菌株.其产铁载体能力约为其他假单胞菌的五倍左右.是很好的研究铁载体合成调控机制的实验材料.由于假单胞菌种属特异性及铁载体本身的多样性和复杂性，本实验室用转座子质粒pBT20对HYS进行转座插入突变，筛选铁载体合成发生改变的突变株。共筛选了19,635株突变株，得到40株在CAS检测平板上生长正常但是铁载体产量有变化的突变株。其中34株产量明显减少，1株产量稍有增加，还有5株开始产量低于野生型，后与野生型相当。通过Tail-PCR，半随机PCR，转座子挽救相结合，得到了所有转座突变株插入位点处的基因，共24个。其中双组分调控系统GacS/GacA插入突变株产铁载体能力明显下降，对这两个基因进行定点敲除，根据在CAS检测平板上的螫合圈大小，敲除株产铁载体能力均比野生型低很多，约为野生型的1/36，回补菌株又可以回复到野生型的水平，说明GacS/GacA双组分调控系统在HYS产铁载体过程中有着重要的正调控作用。

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来源
《中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会》|2013年|341|共1页
会议地点哈尔滨
作者
于鑫焱; 陈敏; 谢志雄;
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作者单位

中国遗传学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 Q939.112;
关键词
假单胞菌; 铁载体; 基因表达; 转座突变;

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