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家蚕谷胱甘肽-S-转移酶BmGSTe4基因的克隆及功能分析

摘要

谷胱甘肽-S-转移酶是广泛分布于真核生物和原核生物中的一种同工酶超家族,具有分解内源和外源性有毒物质的能力.本文克隆了家蚕一个Epsilon家族同源物BmGSTe4基因,该基因的ORF长为654bp,编码218个氨基酸,N-末端由β-α-β-αL-β-β-α7个结构基序组成,在近N-端有一保守的Ser位点,即GSTs的催化活性中心,而C-末端则由6个α螺旋构成.BmGSTe4基因上游2500bp序列内共存在14个预测的转录调控元件结合位点,分别是:XRE(1)、ARE(6)、TRE(5)和NF-kB(2).RT-PCR检测结果表明BmGSTe4基因仅在家蚕表皮和头部中表达,并且在表皮中表达量较头部表达量高.利用重组杆状病毒真核表达系统真核表达的BmGSTe4蛋白具有GSTs酶活性.农药辛硫磷分别对家蚕进行熏蒸和添食处理后,BmGSTe4表达显著下调;在HEK293细胞中异位表达BmGSTe4可抑制细胞凋亡.这些研究结果表明,BrnGSTe4具有GSTs酶活性,对辛硫磷农药敏感,并具有抑制细胞凋亡的作用。

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