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低氧微环境增强喉癌细胞系肿瘤干细胞相关生物学特性

摘要

目的:探索低氧微环境对喉癌细胞系肿瘤干细胞相关的生物学特性是否具有调控作用。rn 方法:采用低氧(1%O2)及常氧(21% O2)两种条件培养喉癌Hep-2及AMC-HN-8细胞系,比较这两种氧分压培养条件下喉癌肿瘤干细胞相关的生物学特性的差异,包括流式细胞仪检测细胞周期分布(GO/G1期细胞比例),荧光实时定量PCR,western blot及免疫细胞荧光检测干细胞相关调控基因(OCT4,SOX2及NANOG)的mRNA及蛋白表达水平,流式细胞仪检测喉癌细胞系中CD 133+干细胞亚群的比例改变,CCK-8实验检测喉癌细胞的体外增殖能力,Transwell实验检测喉癌细胞的基质胶侵袭能力,无血清培养基检测球体形成能力及平板克隆实验检测克隆形成能力。rn 结果:低氧能够明显增加Hep-2及AMC-HN-8细胞系中GO/G1期细胞的比例,在mRNA及蛋白水平增加OCT4,SOX2及NANOG基因的表达水平以及增加这两个喉癌细胞系中CD133+干细胞亚群的比例;此外,低氧培养条件下的Hep-2及AMC-HN-8细胞系增殖能力较常氧条件下无明显统计学差异,然而低氧预处理48小时后重新放置于常氧培养条件的喉癌细胞系却表现出比常氧培养条件下明显增强的增殖能力、侵袭能力、球体形成及克隆形成能力。rn 结论:低氧微环境能够逆转部分处于非干细胞状态的喉癌细胞进人到处于相对静止期的干细胞样状态,从而增强喉癌细胞系肿瘤干细胞相关的生物学特性。

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