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禽流感病毒基质蛋白及核蛋白的酵母融合表达、初步纯化及检测

摘要

利用毕赤酵母表达系统进行了禽流感病毒基质蛋白及核蛋白在毕赤酵母中的融合表达研究.首先构建中间质粒pMD18-T-M-Np,并将M-Np融合基因插入酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-M-Np;再将所获重组质粒经Bpu1102Ⅰ线性化后,电转化GS115感受态细胞,以插入的方式进行重组,并经PCR鉴定,得到重组酵母工程菌;用甲醇诱导分泌表达目标蛋白,并进行初步纯化.经SDS-PAGE和Western-blotting检测,结果表明,M-Np融合蛋白在毕赤酵母中获得表达。

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