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融合骨唾液酸蛋白的酵母表达载体、纯化方法及其应用

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本发明公开了一种融合骨唾液酸蛋白的酵母表达载体、纯化方法及其应用，属于基因工程和微生物发酵工程技术领域。本发明首先根据GenBank中人骨唾液酸蛋白(hbsp)基因序列设计基因特异性引物，应用RT－PCR技术从人股骨外膜组织的总RNA中扩增出BSP的cDNA，克隆至pBluescript II RI质粒中，构建重组质粒pB－hbsp。根据毕赤酵母分泌型表达质粒pPICZaA及hbsp基因序列设计PCR引物，以重组质粒pB－hbsp为模板进行PCR扩增，PCR产物与质粒pPICZaA重组，构建分泌型融合表达rhBSP－His6的质粒pPICZaA－hbsp。融合表达的rhBSP－His6应用固定化金属离子亲和层析(IMAC)法进行纯化，目的蛋白rhBSP达到电泳纯。本发明为BSP的获得提供了一条新途径，为深入研究BSP免疫学和生物学性质和探索其作为药物治疗靶点的可行性奠定了基础。

著录项

公开/公告号CN101063146A

专利类型发明专利
公开/公告日2007-10-31

原文格式PDF
申请/专利权人王捷;夏冰;
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申请/专利号CN200710027791.7
发明设计人王捷;夏冰;
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申请日2007-04-28
分类号C12N15/81;C12N15/12;C07K14/47;C07K1/14;C07K16/18;C12R1/84;
代理机构广州知友专利商标代理有限公司;
代理人李海波
地址 510010 广东省广州市流花路111号广州军区广州总医院医学实验中心
入库时间 2023-12-17 19:20:12

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2010-07-14

发明专利申请公布后的视为撤回 IPC(主分类):C12N15/81 公开日:20071031 申请日:20070428

发明专利申请公布后的视为撤回
2007-12-26

实质审查的生效

实质审查的生效
2007-10-31

公开

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