人参皂苷Rg1对三维培养关节软骨细胞增殖与表型的作用

摘要

目的:从中西医结合方面讨论中医药对体外培养软骨细胞的作用.将SD大鼠关节软骨细胞接种于外消旋聚乳酸(PDLLA)支架中并在体外培养,用含人参皂苷Rg1(G-Rg1)培养基培养,探讨G-Rg1对三维培养中软骨细胞表型的稳定及增殖作用.方法:①SD大鼠关节软骨细胞体外培养.②收集第三代软骨细胞计数并种植于PDLLA中每日倒置显微镜下观察细胞形态、生长情况.③倒置显微镜,电镜下观察G-Rg1作用下软骨细胞形态学改变.④免疫组化法观察G-Rg1对支架内软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响.⑤应用SPSS17.0统计软件分析处理,数据以均数±标准差表示,采用t检验和方差分析进行组间比较.结果:①单层培养至第5代、6代大多数细胞成纤维样变,三维组连续培养6周HE染色显示软骨细胞形态始终保持圆形,胞质内紫红色异染,胞核大且圆,有些区域出现细胞重叠生长.②单层培养6周细胞Ⅱ型胶原免疫组化检测细胞无棕黄色着色,呈阴性.③单层培养软骨细胞短期内的增殖速率明显高于三维培养组(P<0.05),1周内增殖倍数约为7倍,第7天后,细胞增长缓慢并呈现下降趋势.三维培养组增殖一直呈上升趋势,且在第4~8天含40μmol/LG-Rg1的三维培养组增殖速率明显高于不含G-Rg1的三维培养组(P<0.05).结论:G-Rg1对三维培养SD大鼠关节软骨细胞具有维持细胞表型稳定,并可明显促进SD大鼠关节软骨的增殖和基质的合成.

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