胰岛素样生长因子Ⅰ对三维培养兔关节软骨细胞增殖和表型的影响

吴剑宏; 王秋根; 张秋林; 陆晴友; 王万宗; 张素贞

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胰岛素样生长因子Ⅰ对三维培养兔关节软骨细胞增殖和表型的影响

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目的:研究胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF -Ⅰ)对藻酸盐凝胶三维培养条件下兔关节软骨细胞的影响。方法:利用机械与酶消化的方法获得均一性的兔关节软骨细胞,在单层培养条件下增殖至P2代;将P2代细胞高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质,进行三维培养,另一组在进行三维培养的同时,在培养液中加入IGF -Ⅰ50 ng/ml,绘制各组细胞生长曲线,并与单层培养对照组细胞进行比较。将培养细胞行Ⅱ型胶原免疫组织化学检测,H E染色观察细胞形态。进行不同浓度IGF- Ⅰ作用下的三维培养软骨细胞MTT检测,观察0、25、50、75、100 ng/ml IGF0 Ⅰ对三维培养软骨细胞各时间点的促增殖作用。结果:IGF 0Ⅰ可明显刺激三维培养条件下关节软骨细胞增殖及集落形成;不同浓度的IGF 0Ⅰ均可促进关节软骨细胞增殖,以50 ng/ml浓度时D490值最高。培养6周后从凝胶体系中收获细胞的软骨特异性Ⅱ型胶原表达水平较转入三维体系前未见降低。结论:IGF Ⅰ可明显刺激藻酸盐三维培养条件下的关节软骨细胞增殖及集落形成,且细胞表型稳定。

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来源
《海军军医大学学报》 |2005年第4期|418-421|共4页
作者
吴剑宏; 王秋根; 张秋林; 陆晴友; 王万宗; 张素贞;
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作者单位

第二军医大学长海医院骨科;

长海医院血管外科;

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正文语种 chi
中图分类关节疾病及损伤;
关键词
胰岛素样生长因子Ⅰ; 关节; 软骨细胞; 三维培养; 藻酸盐; 细胞增殖; 表型;

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