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首页> 中文会议>中华医学会第十八次全国儿科学术会议 >Rho/Rock信号通路在异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌重塑中的作用

Rho/Rock信号通路在异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌重塑中的作用

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目的:研究Rho/Rock信号转导通路在异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌重塑中的作用及其机制.方法:1、将30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成3组:空白对照组(空白组)、ISO模型组(模型组)、法舒地尔(Fas)组,每组10只.模型组、Fas组皮下多点注射ISO建立大鼠心肌纤维化模型,给药结束后Fas组给予法舒地尔分两次腹腔注射6周,模型组及对照组给予等量生理盐水腹腔注射,共6周.2、6周后,用10％水合氯醛麻醉后将大鼠处死,用电子天平准确称量大鼠体重(BW)、心脏重量(HW),计算各组心脏重量指数(HW/BW,即HWI);取左室心肌组织进行苏木素-伊红(HE)染色、MASSON染色,观察心肌细胞直径(MD)及胶原纤维容积分数(CVF)的变化;免疫组织化学方法(IHC)检测心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平,计算平均光密度(IOD);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清脑钠肽(BNP)浓度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织中RhoA、RockmRNA的表达.结果:1、大鼠一般情况:空白对照组:一般状况良好，毛色有光泽，双目灵活有神，行动敏捷，对周围变化反应灵敏，摄食及饮水量可;模型组:大鼠后期毛色逐渐失去光泽，精神萎靡，行动迟缓，喜蜷缩，摄食、饮水量减少;药物干预Fas组一般状况较模型组有明显改善。试验期间，模型组大鼠死亡2只。其余组后未见大鼠死亡。2、心脏重量指数(HWI)的测定:与空白组比较，模型组HWI明显增高;与模型组比较，Fas组HWI显著降低。3、病理学检测:HE染色显示:空白组大鼠心肌结构清晰，形态未见明显异常。模型组大鼠心肌纤维排列紊乱，心肌细胞明显肿大、排列紊乱，细胞核明显增大变圆，肌丝纹理增粗;Fas组大鼠心肌病理学改变有明显改善;与空白组比较，模型组MD和CVF显著升高;与模型组比较，Fas组MD和CVF降低。4、血清学指标BNP检测:与空白组比较，模型组BNP明显升高;与模型组比较，Fas组明显降低。5、免疫组织化学染色方法观察TGF-β1蛋白表达:与空白组比较，模型组TGF-β1蛋白表达明显增高;与模型组比较，Fas组降低。6、RT-PCR法测RhoAm RNA和RockmRNA表达:以β-actin为内参对照，结果以RhoAmRNA, RockmRNA与p-actinmRNA灰度值的比值表示。与空白组比较，模型组RhoAmRNA,RockmRNA表达明显上调;与模型组比较，Fas组RhoAmRNA,RockmRNA明显下调。结论:RhoA/Rock信号转导通路与ISO诱导大鼠心肌重塑中的发生、发展密切相关，阻滞RhoA/Rock信号转导通路可抑制TGF-β1和BNP表达水平，降低MD, CVF，减轻心肌纤维化。

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