救必应总黄酮对产ESBLs大肠杆菌的抑菌作用研究

摘要

以中药救必应为研究对象,提取救必应总黄酮.采用联合传代法、微量棋盘稀释法测定救必应总黄酮联合抗菌药物后的抑菌效果及联合作用方式.以产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrumβ-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌为受试菌,初步研究救必应总黄酮的抑菌作用.通过平板菌落计数法检测不同浓度救必应总黄酮对产ESBLs大肠杆菌生长曲线的影响;采用琼脂糖凝胶电泳检测经救必应总黄酮作用后受试菌基因组DNA含量的变化;采用Annexin V和PI双染色法检测受试菌经药物作用后能否发生凋亡及引起凋亡的比例;采用蛋白质谱分析救必应总黄酮对受试菌主要蛋白含量的影响.结果显示:救必应总黄酮与11种抗菌药联合作用于受试菌,出现协同或相加作用.救必应总黄酮可明显抑制产ESBLs大肠杆菌的生长,且细菌的生长抑制程度与救必应总黄酮的浓度成正相关;能够降低产ESBLs大肠杆菌基因组DNA含量并引起该受试菌凋亡的比例增加;通过蛋白质谱分析,主要影响果糖-1,6-二磷酸醛缩酶和ADP-甘油-甘露糖-6-差向异构酶两种蛋白含量.综上可知,救必应总黄酮与不同抗菌药联合对不同的受试耐药菌均具有较好的抑菌作用,并能够影响产ESBLs大肠杆菌的生长速度与数量、降低其基因组DNA的含量,引起细胞凋亡与相关酶的含量.

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