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成人脂肪来源间充质干细胞的体外分离、培养与鉴定研究

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目的:探索成人脂肪来源间充质干细胞的体外分离、培养和鉴定的方法.rn 方法:采用50ml注射器负压抽吸成人腹部皮下堆积脂肪组织,酶消化法分离、培养间充质干细胞,观察细胞形态并绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间.以第2代细胞进行免疫组织化学粢色,鉴定其表面分子CD44表达.取2～4代细胞用含体积分数为10％胎牛血清、1％青链霉素原液、10μmol/L地塞米松、10μmol/L胰岛素、0.5mmol/LIBMX的高糖DMEM培养基中诱导培养一周,观察细胞形态变化.2周后再进行诱导培养,对成脂诱导组进行油红O脂肪颗粒染色,对成骨诱导组进行碱性磷酸酶组化染色,对成软骨诱导组进行Ⅱ型胶原染色,对成肌诱导组进行肌浆球蛋白组化染色.rn 结果:成人脂肪组织中含有大量间充质干细胞,呈成纤维细胞样贴壁生长,细胞群体倍增时间为60h左右;免疫化学染色鉴定CD44阳性;油红O染色、碱性磷酸酶染色、Ⅱ型胶原染色阳性、肌浆球蛋白染色分别呈阳性.rn 结论:初步建立了一种自成人脂肪组织中分离、培养和鉴定间充质干细胞的便捷方法,为其能够作为组织工程理想的种子细胞和广泛应用于临床提供实验依据.

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来源
《福州市科协2013年学术年会》|2013年|353-357|共5页
会议地点福州
作者
陈阳; 察鹏飞; 彭铮; 张成聪;
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作者单位

福州市科协;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 R329.28;
关键词
间充质干细胞; 体外分离; 细胞培养; 鉴定技术; 成人脂肪;

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