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茶多酚对氧化应激状态下乳腺上皮细胞抗氧化功能的影响

摘要

本试验在前期试验成功建立氧化应激损伤模型的基础上,通过添加不同浓度的茶多酚,探讨茶多酚对氧化应激状态下乳腺上皮细胞抗氧化功能的影响,旨在筛选出抗氧化应激的最佳的茶多酚添加剂量.将奶牛乳腺上皮细胞(10000个/mL)接种于96孔板中,培养24h后吸弃原培养液,加入饥饿培养基饥饿16h后吸弃原培养液,加入含不同浓度(0μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mL)茶多酚的DMEM/F12培养液,置37°C,5%CO2培养箱分别孵育0h、6h、8h、12h、24h.根据MTS法,检测各组细胞的增殖率.选取未对上皮细胞生长造成负面影响的茶多酚浓度范围与最佳时间.在茶多酚安全剂量范围与最佳时间确定的基础上,通过细胞培养液中脂质过氧化指标、胞内物质含量的变化以及MTS法检测的细胞增殖率筛选出茶多酚作用的适宜浓度.在确定出茶多酚作用的最佳剂量与最佳时间的基础上,通过实时PCR荧光定量与Western Blot方法探究茶多酚对氧化应激状态下乳腺上皮细胞抗氧化功能的影响.

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